微小RNA-7敲减对小鼠脾脏中T淋巴细胞体外功能的影响

发布时间：2017-09-12 18:23

  本文关键词：微小RNA-7敲减对小鼠脾脏中T淋巴细胞体外功能的影响

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【摘要】：观察微小RNA-7(microRNA-7,miR-7)敲减(Knock down,KD)对小鼠脾脏T淋巴细胞体外功能的影响并探讨其意义。常规分离野生型(wild type,WT)小鼠脾脏T淋巴细胞,经CD3和CD28抗体刺激后,Real-time PCR检测不同时间点(0h;24h;48h)细胞中miR-7的表达变化;进一步用Con A、CD3和CD28抗体刺激miR-7KD小鼠脾脏T淋巴细胞,CCK8检测细胞增殖率;Real-time PCR检测miR-7KD小鼠脾脏T淋巴细胞IL-12、IL-4、IL-6、TNF-α、IFN-γ和IL-10表达的变化;FACS检测CD4+T和CD8+T细胞的数量变化及CD4+T细胞膜分子CD44、CD62L和IL-4、IFN-γ的表达变化。结果显示,WT小鼠脾脏T淋巴细胞活化后,miR-7的表达水平显著上调(P0.05);与WT小鼠相比,在Con A、CD3和CD28抗体作用下miR-7KD小鼠脾脏T淋巴细胞增殖明显增加(P0.05);miR-7KD小鼠脾脏T淋巴细胞IL-12、IL-4、IL-6、TNF-α和IFN-γ水平均明显上调(P0.05),而IL-10表达显著下调(P0.05);FACS检测结果显示CD4+T细胞比例明显上调(P0.05),而CD8+T细胞的比例变化不显著(P0.05);CD4+T细胞膜分子CD62L水平显著下降,CD69及IL-4、IFN-γ的表达水平均显著上调(P0.05)。结果表明,miR-7敲减以后可显著影响小鼠脾脏T淋巴细胞的功能,本实验为后续深入探讨其在T淋巴细胞功能调控中的作用提供实验依据。
【作者单位】： 遵义医学院免疫学教研室暨贵州省生物治疗人才基地;贵州省普通高等学校特色药物肿瘤防治特色重点实验室;
【关键词】： miRNA- 基因敲减 脾脏T淋巴细胞 CD+T细胞
【基金】：国家自然科学基金(31370918) 贵州省高层次创新型人才计划(黔科合人才(2016)4031号) 遵义医学院优秀青年人才计划项目(15ZY-001)
【分类号】：R392
【正文快照】： 近来的研究发现,微小RNA-7(microRNA-7,miR-7)参与了多种肿瘤的发生发展[1-4],且在机体组织器官发育过程,以及多种临床疾病发生发展中起了重要调控作用[5]。我们前期研究显示miR-7在机体胸腺、脾脏等免疫器官表达水平较高[6],且miR-7敲减(Knock down,KD)可显著影响肠系膜淋巴

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本文编号：838807