成年大鼠脊髓厚片自发荧光特异性消除新方法

发布时间：2017-09-13 21:47

  本文关键词：成年大鼠脊髓厚片自发荧光特异性消除新方法

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【摘要】：目的改良成年大鼠脊髓厚片自发荧光的特异性消除方法。方法利用染色前0.01 mol/L柠檬酸钠缓冲液(pH=6.0)80℃水浴热抗原修复45 min和染色后醋酸铵缓冲的0.01 mol/L硫酸铜溶液(p H=5.0)浸润的独立或者联合处理,特异性消除成年大鼠脊髓厚片漂片法免疫荧光染色中的自发荧光。结果染色前柠檬酸钠酸性缓冲液水浴热抗原修复能够显著消除成年大鼠脊髓厚片自发荧光。在此基础上,染色后短时间醋酸铵缓冲的酸性硫酸铜溶液浸润,即可完全消除这些自发荧光,并不减弱漂片法免疫荧光染色的目标荧光信号。结论柠檬酸钠酸性缓冲液水浴热抗原修复-醋酸铵缓冲的酸性硫酸铜溶液浸润的联合处理比较理想地特异性消除成年大鼠脊髓厚片漂片法免疫荧光染色中的自发荧光。
【作者单位】： 四川大学华西基础医学与法医学院组织胚胎学与神经生物学教研室;
【关键词】： 脊髓 厚组织切片 免疫荧光染色 自发荧光 宽场荧光显微镜
【基金】：国家自然科学基金面上项目(31571240)
【分类号】：R361
【正文快照】： 成年啮齿类动物神经组织中存在大量的内源性荧光分子,常规组织处理(如醛类固定剂化学固定)也会带来自发荧光产物。这些发射光谱范围分布广泛的自发荧光严重干扰神经组织厚切片的漂片法免疫荧光染色中目标荧光信号的观察和定量分析[1-3]。目前的自发荧光消除方法缺乏有效性和特

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本文编号：846107