化脓性链球菌溶血素O活性结构重组蛋白的制备

发布时间：2017-09-14 19:37

  本文关键词：化脓性链球菌溶血素O活性结构重组蛋白的制备

  更多相关文章： 化脓性链球菌 链球菌溶血素O重组蛋白 多克隆抗体

【摘要】：生物信息分析化脓性链球菌溶血素O(streptolysin O,Slo)蛋白结构表明,Slo蛋白除含有由461氨基酸残基组成的溶血活性结构域Thiol_cytolysin外,在N端还有一跨膜结构域。利用pET101-GENE蛋白表达系统,成功构建出表达具有Slo活性重组蛋白的重组子,采用镍柱亲和层析分离技术,纯化目的蛋白;纯化蛋白SDS-PAGE检测分析表明,重组蛋白与预测的溶血活性结构域的分子量相一致;溶血实验显示,纯化重组蛋白具有溶血活性。以纯化的重组蛋白为免疫原,对大鼠进行4次免疫,所获得免疫血清经Elisa检测,抗Slo血清效价达到1∶12 800;Western blot检测猪链球菌、马链球菌和化脓性链球菌中的链球菌溶血素结果显示,抗Slo多克隆抗体仅能与化脓性链球菌溶血素O发生反应,表明研究制备的化脓性链球菌溶血素O活性结构重组蛋白抗原具有较好的特异性,所制备的抗原Slo可用于进一步开发抗链球菌溶血素O(ASO)试剂盒。
【作者单位】： 西南交通大学生命科学与工程学院;
【关键词】： 化脓性链球菌 链球菌溶血素O重组蛋白 多克隆抗体
【基金】：国家自然科学基金(31070117) 四川省科技支撑项目(2012FZ0048) 国家大学生创新性实验计划项目(201510613062)资助项目
【分类号】：R392
【正文快照】： 化脓性链球菌(Streptococcus pyogenes)又称A族链球菌(Group A Streptococci,GAS),是一种可引起从普通非侵袭性疾病如咽炎、猩红热、脓疱病到侵袭性和严重侵袭性疾病如风湿热、链球菌感染性肾小球肾炎、坏死性筋膜炎、中毒休克综合征等疾病的常见人类专性致病菌[1]。在链球菌

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 贺翔;银兴峰;张留辉;阳小燕;孙雪松;;利用固定化金属亲和层析和质谱技术鉴定化脓性链球菌铜结合蛋白[J];微生物学通报;2010年11期

2 田福亮;吴剑锋;夏永祥;;化脓性链球菌高毒力株特异基因文库的构建和分析[J];重庆医学;2012年06期

3 吴剑锋;夏永祥;;化脓性链球菌高毒力株特异基因文库的构建和分析[J];国际检验医学杂志;2011年15期

4 朱平;;化脓性链球菌纤维粘连蛋白结合蛋白的研究进展[J];国外医学(微生物学分册);1995年03期

5 庞亮亮;孙建和;;化脓性链球菌毒力演化的载体——噬菌体[J];中国人兽共患病学报;2010年08期

6 金卫东;;化脓性链球菌外毒素A突变株的毒性分析[J];国外医学(微生物学分册);1998年05期

7 吕洁;余光创;孙正华;王南杰;朱颖;王红翠;孙雪松;;应用蛋白质组学的方法分析缺铁培养对化脓性链球菌MGAS5005的影响[J];微生物学通报;2012年04期

8 刘儒意;;在大肠杆菌和化脓性链球菌混合感染中有荚膜及无荚膜脆弱类杆菌和产黑色素类杆菌的致病性[J];国外医学(微生物学分册);1989年05期

9 李慧;吕洁;王红翠;王南杰;李楠;詹胜;阳小燕;孙雪松;;化脓性链球菌脂蛋白FtsB的基因克隆、表达、纯化与功能研究[J];微生物学通报;2011年12期

10 俞红;;化脓性链球菌热激活蛋白的表达及其免疫反应性[J];国外医学(微生物学分册);1999年02期

中国重要会议论文全文数据库 前1条

1 吴剑锋;;化脓性链球菌高毒力株特异的基因文库的构件和分析[A];中华医学会第九次全国检验医学学术会议暨中国医院协会临床检验管理专业委员会第六届全国临床检验实验室管理学术会议论文汇编[C];2011年

中国硕士学位论文全文数据库 前1条

1 胡珊;化脓性链球菌htrA与蛋白分泌相关性初步研究[D];西南交通大学;2013年

，

本文编号：851955