幽门螺杆菌临床菌株的分离培养和鉴定

发布时间：2017-09-14 19:43

  本文关键词：幽门螺杆菌临床菌株的分离培养和鉴定

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【摘要】：目的:建立一种幽门螺杆菌(H.pylori)临床菌株的分离培养的方法。方法:取临床胃黏膜组织标本88株,接种于10%绵羊全血的哥伦比亚选择性培养基上,37℃、5%O2、10%CO2、85%N2培养3~5 d后,挑取血平板上透明细小可疑菌落进行革兰氏染色和尿素酶试验,对阳性菌落进行扩大纯培养,提取细菌DNA,PCR扩增H.pylori 16sRNA、Cag A基因,电泳并进行测序鉴定。结果:成功从临床胃黏膜组织中分离培养出H.pylori,88例胃黏膜组织标本中分离培养并鉴定出H.pylori 19株,阳性率为22%;对16sRNA及Cag A基因进行扩增,电泳可见目的条带,并对16sRNA扩增产物测序,与H.pylori国际标准菌株26695比对,同源性为95%~99%。结论:37℃、5%O2、10%CO2、85%N2条件下10%绵羊全血的哥伦比亚选择性培养基上能成功分离培养出H.pylori临床株。
【作者单位】： 贵州医科大学;贵州医科大学分子生物学重点实验室;
【关键词】： 幽门螺杆菌 分离培养 临床菌株 革兰染色 CagA基因
【基金】：国家自然科学基金(No.81260303)
【分类号】：R378.2
【正文快照】： 幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)是一种呈螺旋状或S形、微需氧的革兰氏阴性杆菌,由澳大利亚科学家Mashall和Warren于1983年从慢性胃炎病人的胃黏膜中首次分离并成功培养[1-2]。H.pylori是全球最常见的感染性病原菌之一,是慢性胃炎、胃溃疡的主要致病因素[3-4],与胃

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本文编号：851997