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细粒棘球蚴转化生长因子βⅡ型受体胞外域基因的克

发布时间:2017-09-20 00:19

  本文关键词:细粒棘球蚴转化生长因子βⅡ型受体胞外域基因的克隆、表达及抗血清制备


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【摘要】:目的构建细粒棘球蚴(Echinococcus granulosus,Eg)转化生长因子βⅡ型受体胞外域(Extracellular Domain of Transforming Growth Factor beta type Ⅱ receptor of Eg,EgTβRⅡ-E)原核表达载体,诱导表达融合蛋白并制备其特异性抗体。方法采集羊源Eg原头蚴,Trizol法提取总RNA,RT-PCR扩增EgTβRⅡ-E基因,构建pET28a-EgTβRⅡ-E原核表达载体,PCR、限制性内切酶双酶切和测序鉴定正确的阳性质粒转入BL21E.coli感受态细胞,IPTG诱导EgTβRⅡ-E融合蛋白表达并免疫小鼠,制备抗血清。结果成功构建pET28a-EgTβRⅡ-E原核表达载体,经0.6mmol/L IPTG诱导表达18ku的EgTβRⅡ-E融合蛋白。用融合蛋白免疫小鼠,获得高效价(1∶256 000抗血清)。结论制备的EgTβRⅡ-E融合蛋白具有抗原性,免疫小鼠获得高效价的抗血清,为研究EgTβRⅡ的生物学功能奠定了基础。
【作者单位】: 新疆医科大学第一附属医院/临床医学研究院新疆包虫病基础医学重点实验室;新疆医科大学基础医学院生理学教研室;新疆医科大学基础医学院生物化学教研室;
【关键词】细粒棘球蚴 转化生长因子βⅡ型受体 基因克隆 抗血清
【基金】:新疆维吾尔自治区自然科学基金项目(No.2015211C029)
【分类号】:R383.33
【正文快照】: *?**?囊型包虫病(cystis echinococcosis,CE)是由细粒棘球蚴(Echinococcus granulosus,Eg)感染所致的人畜共患寄生虫病,我国西部七省区(新疆、青海、宁夏、甘肃、西藏、四川、内蒙古)为高流行区,受威胁人口达6 600万,每年造成经济损失逾30亿元[1-2]。人畜经口误食Eg虫卵,在胃

【参考文献】

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1 倪兴维;闫鸿斌;娄忠子;贾万忠;;多房棘球绦虫信号转导体系[J];中国寄生虫学与寄生虫病杂志;2012年03期

【共引文献】

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1 李亮;李静;张传山;吕国栋;毕晓娟;林仁勇;;细粒棘球蚴转化生长因子βⅡ型受体胞外域基因的克隆、表达及抗血清制备[J];中国病原生物学杂志;2016年08期

【二级参考文献】

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1 倪兴维;贾万忠;者永辉;金科;;棘球蚴体外培养技术的应用[J];中国寄生虫学与寄生虫病杂志;2011年04期

【相似文献】

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1 钟万剑;突尼斯羊肝脏中的细粒棘球蚴:宿主年龄的影响[J];国外医学(寄生虫病分册);2000年01期

2 林仁勇,丁剑冰,温浩,卢晓梅;新疆细粒棘球蚴95基因的克隆及同源性分析[J];中国寄生虫病防治杂志;2002年05期

3 王娅娜,赵嘉庆,丁淑琴,王健,赵巍;细粒棘球蚴中国大陆株铁蛋白基因分子克隆和序列分析[J];宁夏医学院学报;2005年04期

4 张静;赵嘉庆;王娅娜;张焱;王淑静;王洁;高岭;赵巍;;细粒棘球蚴中国大陆株亲肌肉基因分子克隆和序列分析[J];宁夏医学院学报;2006年03期

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7 温浩;姚秉礼;邹培范;丁兆勋;;丙硫咪唑对小鼠细粒棘球蚴作用的观察[J];新疆医学院学报;1989年02期

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10 温浩,姚秉礼,邹培范,丁兆勋;阿本达唑对小鼠细粒棘球蚴的作用[J];寄生虫学与寄生虫病杂志;1990年04期

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5 王娅娜;细粒棘球蚴中国大陆株铁蛋白基因的克隆、重组表达、纯化及免疫学特性鉴定[D];宁夏医学院;2006年

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7 印双红;TGF-β抑制自然杀伤细胞在细粒棘球蚴免疫逃逸作用中的初步探讨[D];石河子大学;2014年

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10 师志云;细粒棘球蚴(中国大陆株)重组EgP-29抗原的克隆、表达、免疫保护力及其免疫机制的研究[D];宁夏医学院;2008年



本文编号:884784

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