炙马钱子对自身免疫性重症肌无力大鼠模型的免疫调节作用

发布时间：2017-09-28 19:12

  本文关键词：炙马钱子对自身免疫性重症肌无力大鼠模型的免疫调节作用

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【摘要】：目的观察炙马钱子对实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)大鼠模型的血清AChRab、IL-6和TGF-β1水平的影响,进一步探讨炙马钱子对重症肌无力(MG)的免疫调节机理。方法从50只雌性Lewis大鼠中随机留取8只作为正常对照组,剩余的42只采用鼠源AChR-a97-116肽段(R97-116)免疫方法建立EAMG模型,经评估后最终确定成功40只。将这40只大鼠随机分为模型对照组,阳性药物对照组,炙马钱子低剂量、中剂量和高剂量组,均给予灌胃治疗。炙马钱子低、中、高剂量组剂量分别为75mg/kg·d、 150mg/kg-d和225mg/kg-d,阳性药物对照组剂量为强的松4mg/kg-d,每日给药1次；正常对照组和模型对照组给予药液等量的蒸馏水灌胃,共治疗28天。给药结束后观察各组EAMG大鼠临床表现和体质量的情况,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测正常对照组和建模各组大鼠血清中体液免疫指标AChRab及细胞免疫指标IL-6、TGF-β1的含量情况,以探讨炙马钱子对EAM G大鼠免疫系统调节的作用机理。结果(1)除正常对照组外,多数大鼠在接受了R97-116免疫后均有不同程度的肌无力表现,且随着时间的延长其肌无力程度愈加显著,特别是四肢的肌无力症状比较典型。共有2只大鼠造模期间死亡,1只死于肌无力症状过重,另1只因皮下注射点出血被同笼其余大鼠咬死。以Lennon临床评分1级以上为肌无力阳性,阳性率85.71%(其中1.5级大鼠26只,2级大鼠9只)。从评分角度说明实验制备大鼠EAMG模型成功,其肌无力评分明显区别于正常大鼠。新斯的明试验结果,除死亡大鼠外,其余造模鼠新斯的明试验均为阳性,阳性率97.62%。(2)成模后的大鼠EAMG模型对照组血清中AChRab和IL-6、TGF－β1含量相比正常对照组均有显著升高(P0.01),给药后各治疗组含量都有所下降。炙马钱子高剂量组AChRab含量比中、低剂量组下降更显著(P0.01),但与阳性药物对照组比差异无显著性(P0.05)。炙马钱子各剂量组IL-6含量均低于阳性药物对照组,其中炙马钱子中、高剂量组水平降低更为显著(P0.01)。炙马钱子中、高剂量组TGF-β1含量显著低于阳性药物对照组(P0.01),炙马钱子低、中、高剂量组之间,药物剂量越大,TGF-β1含量越低,差异具有统计学意义(P0.01或P0.05)。(3)模型对照组、炙马钱子低剂量组、炙马钱子中剂量组大鼠体质量相比给药前都有显著增加(P0.01或P0.05),且炙马钱子中剂量组与模型对照组大鼠的体质量水平都显著高于阳性药物对照组(P0.05)。结论(1)用皮下注射鼠源AChR-a97-116肽段方法可成功建立EAMG模型,本模型可用于MG发病机制的研究及药物疗效的观察等。(2)炙马钱子能降低EAMG大鼠血清中AChRab与IL-6水平,其原理可能是通过抑制机体的免疫活化过程而发挥作用,从而减少自身免疫反应对突触后膜AchR的损害以缓解MG病情,不同浓度的炙马钱子免疫调节的程度也各不相同。(3)炙马钱子可能通过调节血清中TGF-β1水平维持机体免疫激活与免疫抑制的动态平衡,一定浓度范围内的炙马钱子在EAMG的免疫调节及体质量的改善等方面更为安全有效。
【关键词】：炙马钱子 重症肌无力 EAMG模型 免疫调节 细胞因子 AChRab IL-6 TGF-β1
【学位授予单位】：浙江中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R245;R-332
【目录】：

• 文中主要英文缩写一览表5-6
• 中文摘要6-8
• ABSTRACT8-10
• 前言10-12
• 一、材料与方法12-16
• (一) 实验材料12-13
• 1. 实验动物12
• 2. 实验药品12
• 3. 主要实验试剂12
• 4. 主要仪器12-13
• (二) 实验方法13-14
• 1. EAMG实验大鼠模型的建立13
• 2. EAMG实验动物模型的评估标准13
• 3. 分组与处理13
• 4. 给药剂量与方法13-14
• 5. 检测指标14
• (三) 统计方法14-16
• 二、结果16-20
• (一) EAMG造模期间大鼠状况观察16
• 1. 造模期间大鼠的一般情况16
• 2. 建模后各组大鼠模型评估情况16
• (二) 各组大鼠的给药过程与具体的样本送检情况16-17
• (三) 药物干预后各组大鼠血清中被检测指标的含量17-18
• 1. 治疗后各组大鼠血清中AChRab含量的比较17
• 2. 治疗后各组大鼠血清中IL-6含量的比较17-18
• 3. 治疗后各组大鼠血清中TGF-β1含量的比较18
• (四) 各组大鼠给药前后体质量变化值的比较情况18-20
• 三、分析与讨论20-30
• (一) 大鼠EAMG模型的建立20-22
• 1. 实验动物的选择20
• 2. 关于抗原20-21
• 3. 关于大鼠EAMG模型的判定21-22
• (二) 中医对MG的认识及治疗现状22
• (三) 炙马钱子在MG治疗中的现代药理研究22-23
• (四) 炙马钱子治疗MG相关的免疫调节机理探讨23-28
• 1. 炙马钱子对大鼠血清中AChRab含量的影响24-25
• 2. 炙马钱子对大鼠血清中IL-6含量的影响25-26
• 3. 炙马钱子对大鼠血清中TGF-β1含量的影响26-28
• (五) 有关炙马钱子治疗MG的药物毒性28
• (六) 炙马钱子对MG体质量变化的影响28-29
• (七) 本实验研究中所存在的问题与展望29-30
• 四、结论30-31
• 参考文献31-36
• 附图36-37
• 致谢37-38
• 文献综述38-64
• 参考文献58-64

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前5条

1 王宝学;;董凤声从脾肝肾论治重症肌无力临床经验[J];河北中医;2007年03期

2 况时祥;运用马钱子治疗神经系统疾病探讨[J];河南中医;2004年01期

3 何志义,欧阳嶷,侯率,陈晏,李润辉,吕昌龙;重症肌无力患者血清TGF-β_1和sICAM-1的检测及其临床意义[J];神经疾病与精神卫生;2001年02期

4 黄春华;赵丽群;胡连根;;饶旺福治疗重症肌无力[J];江西中医药;2007年05期

5 邓斌;;邓毓漳治疗重症肌无力经验[J];江西中医药;2010年04期

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本文编号：937581