欧洲型PRRSV、PCV2重组痘病毒疫苗灌注式生物反应器培养工艺的建立

发布时间：2017-10-07 17:48

  本文关键词：欧洲型PRRSV、PCV2重组痘病毒疫苗灌注式生物反应器培养工艺的建立

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【摘要】：目的利用微载体-生物反应器技术培养乳仓鼠肾细胞,接种重组痘病毒rVTT-ORF2-EUO3O5,建立规模化制备欧洲型PRRSV、PCV2重组痘病毒疫苗的灌注式生产工艺。方法利用2L体积灌注式生物反应器培养BHK细胞,设定培养参数为温度37℃、溶氧度(DO)为60%,转速为80r/min,pH值为7.3。当90%微载体表面贴满BHK细胞时以0.1MOI的感染剂量接种重组痘病毒rVTT-ORF2-EUO3O5,设定感染参数为温度35℃、DO为50%、转速为50r/min,pH值为7.1,继续培养观察。结果在采用灌注式生物反应器技术制备重组痘病毒过程中的细胞培养阶段,细胞培养96h可获得1.587×1010个细胞数,细胞增殖39.67倍;在病毒增殖阶段,微载体上细胞完全脱落时的病毒滴度为2.12×109 PFU/ml。结论成功建立了欧洲型PRRSV、PCV2重组痘苗病毒灌注式生产工艺,为规模化制备重组痘病毒疫苗提供了技术参数。
【作者单位】： 中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所;吉林农业大学动物科技学院;吉林大学动物医学学院;广西大学动物科学技术学院;
【关键词】： 欧洲型PRRSV PCV 重组痘苗病毒 生物反应器 灌注式生产工艺
【基金】：科技部863项目(No.2011AA10A208) 吉林省科技发展计划项目(No.20140309024NY)
【分类号】：R392
【正文快照】： *?**?猪繁殖与呼吸综合征(俗称蓝耳病)病毒(Por-cine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV),隶属于动脉炎病毒科,呈二十面立体对称,内含单股线状正链基因组RNA,长约15.1kb,主要引起怀孕母猪繁殖障碍和仔猪呼吸困难[1-2]。PRRSV主要引起母猪流产,仔猪严重呼吸疾

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