中东呼吸综合征冠状病毒多重荧光定量RT-PCR检测技术的建立

发布时间：2017-10-07 19:33

  本文关键词：中东呼吸综合征冠状病毒多重荧光定量RT-PCR检测技术的建立

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【摘要】：建立中东呼吸系统综合征冠状病毒(MERS-CoV)感染的筛查与诊断应用的核酸检测方法。本研究建立了基于MERS-CoV三个分子靶标(upE,ORF1b,N2)的双重以及三重的三种荧光定量RT-PCR检测技术方法,分别与前期建立的单重荧光定量RT-PCR(upE或N2)检测方法做了比较,并且采用MERS-CoV病毒毒株、上海提供的口岸发烧病人样本以及由首例中国MERS-CoV韩国地区输入病例的咽拭子样品和全血的样品做了临床验证。结果显示:采用MERS-CoV病毒毒株作为模板,三种新建立的多重检测方法与单重荧光定量RT-PCR检测方法最低检测限均能达到10PFU/mL,且与其他常见呼吸道病毒的阳性样本均无交叉反应,特异性良好。对临床样品的验证中,上海病人咽拭子样本均为阴性,而中国首例MERS输入病例的急性期咽拭子样品均为阳性,而全血样的检测结果显示N2靶标有较高检出率,明显优于基于upE单一靶标。本研究所建立的基于MERS-CoV三个分子靶标(upE,ORF1b,N2)的双重以及三重荧光定量RT-PCR检测技术方法用于MERS-CoV感染的实验室诊断,具有较高灵敏度与特异性及适用性。
【作者单位】： 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所卫生部医学病毒和病毒病重点实验室;
【关键词】： 中东呼吸系统综合征 冠状病毒 荧光定量RT-PCR 多重 检测
【基金】：传染病重大专项(2014ZX10004-001,201310004-101,2013ZX10004601)
【分类号】：R373.9;R440
【正文快照】： 中东呼吸综合征(Middle East respiratorysyndrome,MERS)是由中东呼吸综合征冠状病毒(MERS coronavirus,MERS-CoV)感染所致的急性呼吸道传染病,是继严重急性呼吸综合征冠状病毒(severe acute respiratory syndrome coronavirus,SARS-CoV)后的一种新发现的感染力强、病死率高、

【参考文献】

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【共引文献】

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本文编号：989676