MUC1 mRNA体外负载树突状细胞诱导细胞毒性T细胞对非小细胞肺癌的杀伤作用

发布时间：2017-10-09 12:06

  本文关键词：MUC1 mRNA体外负载树突状细胞诱导细胞毒性T细胞对非小细胞肺癌的杀伤作用

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【摘要】：目的:将体外扩增的黏蛋白1(MUC1)mRNA转染入成熟的树突状细胞(DCs),观察其体外诱导的特异性抗肿瘤效应。方法:将分离提纯的单核细胞培养诱导为DC并用流式细胞术鉴定。构建pcDNA3.1(+)-MUC1质粒,体外转录为mRNA,电穿孔法转染DCs。定量PCR检测转染的DCs中MUC1的表达;MTT法检测T细胞增殖情况;流式细胞术检测CD8+在T细胞的表达;LDH释放法测定细胞毒性,ELISA检测IFN-γ分泌水平。结果:流式细胞术结果表明成熟DCs标志表型的表达明显高于对照组。定量PCR结果说明转染后的DCs MUC1 mRNA相对表达量增高。转染组DCs与T细胞按1∶10共培养时,刺激增殖能力明显高于未转染组,且CD8+T细胞表达率高于未转染组,诱导产生特异性的细胞毒性T细胞杀伤表达MUC1蛋白的靶细胞,而未转染组的杀伤作用较弱。转染组DCs与T细胞共培养的上清中IFN-γ的分泌水平高于未转染组。结论:电穿孔法可以将MUC1 mRNA成功转染至DCs,产生特异性杀伤效应,为以MUC1为靶点的非小细胞肺癌的免疫治疗提供实验和理论依据。
【作者单位】： 中山大学附属第三医院呼吸内科;中山大学附属第三医院内科ICU;
【关键词】： 树突状细胞 黏蛋白 电转染 抗肿瘤免疫 肺肿瘤
【基金】：广东省科技计划(No.2011B061300009) 国家自然科学基金资助项目(No.81170004) 国家自然科学青年基金资助项目(No.81000986)
【分类号】：R392
【正文快照】： 肺癌是目前最常见同时也是死亡率最高的恶性肿瘤[1],其中约86%为非小细胞肺癌(non-small celllung cancer,NSCLC)[2]。尽管在肿瘤的全身化疗及靶向治疗方面取得很大进展,但由于肺癌尤其是NSCLC的预后极差,约半数病人会复发,且对化疗的有效率小于25%,因此迫切需要探索新的治疗

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本文编号：1000090