人骨髓间充质干细胞释放膜微囊条件探索

发布时间：2017-10-11 01:35

  本文关键词：人骨髓间充质干细胞释放膜微囊条件探索

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【摘要】：间充质干细胞(MSC)释放膜微囊(MV)是其促血管再生的重要机制。本研究旨在探索人骨髓MSC释放MV的适宜条件。收集5份健康人骨髓标本,分离培养并鉴定MSC。将第5代MSC分别悬浮于含10%胎牛血清或无血清的培养液中,按2×106/皿接种于直径为150 mm的培养皿中,在低氧(1%氧浓度)或常氧条件下培养72h,每组20皿。将培养上清高速离心收获MV。计数培养后贴壁细胞,并测定MV蛋白质含量。电子显微镜观察MV的形态以鉴定MV。流式细胞术分析MV的表面标志。在脐静脉内皮细胞培养体系中,加入不同来源的MV(10μg/ml),培养72 h后利用MTT实验观察细胞增殖活性。结果表明:多数MSC释放的MV直径100 nm,在电子显微镜下呈特征性的中空膜样结构。MV表达CD29、CD44、CD73和CD105,不表达CD31和CD45。在常氧含血清、常氧无血清、低氧含血清和低氧无血清条件下,台盼蓝抵抗的贴壁细胞扩增倍数分别为4.1、1.8、5.8和3.7,计算108细胞释放的MV蛋白含量分别为463.48±138.74、1604.07±445.28、2389.64±476.75和3141.18±353.01μg。MTT实验表明,低氧条件下获得的MV具有更好的促内皮细胞增殖作用。结论:低氧可促进MSC释放MV,低氧和无血清培养MSC可能是制备MSC-MV的适宜条件。
【作者单位】： 广州市开发区医院南方生物治疗中心;军事医学科学院放射与辐射医学研究所实验血液学研究室;
【关键词】： 骨髓 间充质干细胞 膜微囊
【基金】：国家自然科学基金(30971068) 广州开发区科技局课题(2009Q-P081;2010Q-P035)
【分类号】：R329.28
【正文快照】： 间充质干细胞(MSC)是一种成体干细胞,具有很强的体外增殖能力、对各种免疫细胞功能的调节作用和向成骨细胞、成脂细胞及成软骨细胞的分化功能[1-2]。MSC用于治疗免疫相关性疾病和骨关节损伤等多种疾病已进入临床试验[3]。MSC也有很强的促血管再生作用。基于此,人们已经开展了

【共引文献】

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