埃博拉病毒NP抗原表位区段的克隆和表达
本文关键词:埃博拉病毒NP抗原表位区段的克隆和表达
【摘要】:目的分析埃博拉病毒核蛋白(NP)抗原表位,克隆表达埃博拉病毒NP抗原,为免疫学诊断试剂的研究奠定基础。方法采用BioSun生物学软件预测分析埃博拉病毒NP抗原的氨基酸表位区间,采用大肠杆菌优势密码子反向翻译成基因序列,采用PCR退火合成法合成NP优势密码子抗原基因,并利用载体pBVIL1进行克隆表达。采用间接ELISA技术评价获得NP抗原的特异性。结果确定埃博拉病毒NP抗原的氨基酸表位位于360~739 aa,共设计36条引物,扩增合成1140 bp的NP抗原基因,克隆表达后,融合蛋白相对分子质量为58×103,测序结果显示插入的NP基因正确。初步结果显示,NP抗原的特异性为99.24%(130/131)。结论获得埃博拉病毒NP抗原,为进一步研制特异的埃博拉病毒快速诊断试剂提供了抗原储备。
【作者单位】: 军事医学科学院基础医学研究所;
【关键词】: 埃博拉病毒 核蛋白 抗原表位区段 表达
【基金】:国家科技重大专项资助项目(2013ZX10004-803);国家科技重大专项资助项目(2011ZX10004-001)
【分类号】:R373
【正文快照】: 2014年3月暴发的西非埃博拉疫情已造成上千人死亡,防控形势十分严峻。埃博拉病毒感染潜伏期为2~21 d,死亡率高达50%~90%,被视为最为恐怖的疾病之一。由于无有效的疫苗和药物,因此,早诊断、早隔离并采取对症和支持治疗,是控制埃博拉疫情的关键[1]。埃博拉病毒为单股负链RNA病毒
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,本文编号:1019635
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