结核分枝杆菌标准株mazEF6缺失株的构建

发布时间：2017-10-13 13:24

  本文关键词：结核分枝杆菌标准株mazEF6缺失株的构建

  更多相关文章： 结核分枝杆菌 毒素-抗毒素系统 缺失突变株

【摘要】：为构建结核分枝杆菌标准株H37Rv毒素-抗毒素系统maz EF6基因缺失突变株。采用聚合酶链反应(PCR)技术,分别从H37Rv和PUC-19K质粒上扩增出maz EF6基因的同源臂及卡那霉素抗性基因kan基因;应用融合PCR技术将maz EF6基因的同源臂和kan基因进行杂交拼接,获得目的融合片段,并将该融合片段克隆于p MD-19T(simple)载体形成自杀质粒p MD-19T-Δmaz EF6-kan,将构建的自杀质粒转化至大肠杆菌DH5a中;利用电穿孔技术将自杀质粒电转至H37Rv标准株中;并将该菌株涂于卡那霉素抗性改良罗氏培养基,培养3-4周后,刮取能在卡那霉素抗性培养基中生长的结核分枝杆菌单个菌落,以提取的阳性菌株全基因组DNA为模板,PCR扩增克隆片段,并测序。对所获得H37RvΔmaz EF6缺失突变株进行遗传稳定性检测。结果显示,该缺失株在15代内未发生回复性突变,成功获得H37RvΔmaz EF6缺失突变株。由此可知,本研究为今后研究毒素-抗毒素系统maz EF6基因的生物学功能奠定基础。
【作者单位】： 石河子大学医学院病原生物学与免疫学教研室;石河子大学医学院第一附属医院神经内科;
【关键词】： 结核分枝杆菌 毒素-抗毒素系统 缺失突变株
【基金】：国家自然科学基金项目(81160368,81341079)
【分类号】：R378.911
【正文快照】： 结核病(tuberculosis,TB)是一种由结核分枝杆菌(Mycobacteria tuberculosis,MTB)感染引起的最常见的人兽共患慢性传染病。随着MTB的耐药率增加、HIV合并MTB感染的增多,结核病在全球的流行日趋增强。结核分枝杆菌的毒素-抗毒素系统(toxin-antit-oxinsystem,TAS)也被称为成瘾或

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 何飚;麻疹病毒核蛋白在大肠杆菌中的表达:用缺失突变株定位抗原性位点[J];国外医学.预防.诊断.治疗用生物制品分册;1990年01期

2 欧阳谦;马文丽;刘翠华;郑文岭;;PhoB缺失突变株的构建及其性状的初步研究[J];广东医学;2006年01期

3 陈冬松,方文刚,陈誉华,宋今丹;大肠杆菌侵袭基因缺失突变株与人脑微血管内皮细胞的相互作用[J];细胞生物学杂志;2005年03期

4 ;[J];;年期

5 ;[J];;年期

6 ;[J];;年期

7 ;[J];;年期

8 ;[J];;年期

9 ;[J];;年期

10 ;[J];;年期

中国重要会议论文全文数据库 前5条

1 雷娟娟;李力;施巧琴;吴松刚;黄建忠;;酿酒酵母SNF1基因缺失突变株的构建及生物学特性研究[A];华东六省一市生物化学与分子生物学会2009年学术交流会论文摘要汇编[C];2009年

2 黄薇;田宝玉;柯崇榕;黄建忠;;蛋白酶胁迫下线虫的体壁覆盖层蛋白组学分析[A];华东六省一市生物化学与分子生物学会2010年学术交流会论文集[C];2010年

3 张红娟;陈军;李素芳;沈金慧;李白;言思敏;林佳楠;徐晓晖;;表达绿色荧光蛋白的单核细胞增生李斯特菌lmo1078缺失突变株的构建[A];遗传学与社会可持续发展——2010中国青年遗传学家论坛论文摘要汇编[C];2010年

4 马瑞强;洪浩舟;张颖;陈明;林敏;;大肠杆菌乙醇代谢途径的改造和优化[A];2008年中国微生物学会学术年会论文摘要集[C];2008年

5 周英;寇海萍;汪志刚;;酵母TF11H的Tfb5与Tfb2相互作用并促进NER的修复作用(英文)[A];第二届贵州省自然科学优秀学术论文评选获奖论文集（2007年）[C];2007年

中国博士学位论文全文数据库 前1条

1 刘翠华;人粘膜病原微生物的分子致病机理及分子诊断学研究[D];第一军医大学;2005年

中国硕士学位论文全文数据库 前9条

1 蔡忠贞;克雷伯氏肺炎杆菌乳酸脱氢酶基因缺失突变株的构建及其应用[D];新疆大学;2008年

2 张晓莉;单核细胞增生李斯特菌毒力基因actA转录调控机制的初步研究和缺失突变株的构建[D];华中师范大学;2009年

3 蔡轲;不同粘细菌来源的mts基因功能差异分析[D];山东大学;2009年

4 谢妙妙;鸭疫里氏杆菌ECFs sigma基因缺失突变株的构建及其生物学特性研究[D];华中农业大学;2014年

5 周泷;胸膜肺炎放线杆菌血清7型S8△clpP/△apxⅡC/△fur三基因缺失弱毒株的构建及保护效力评价[D];中国农业科学院;2014年

6 张静飞;福氏2a志贺氏菌2457T mxiE基因功能的研究[D];南昌大学;2009年

7 宋浩雷;利用敲除技术构建酿酒酵母SFA1/ADH3基因缺失突变株的研究[D];福建师范大学;2007年

8 王斌;猪胸膜肺炎放线杆菌双组份调控系统PhoBR的功能研究[D];华中农业大学;2014年

9 杨佳银;迟缓爱德华氏菌基因组fosmid文库的构建、opp基因簇的克隆及aroA基因缺失突变株的构建[D];中国科学院研究生院（海洋研究所）;2008年

，

本文编号：1025070