SB203580对脾脏树突状细胞介导的OT-Ⅱ细胞增殖及分化的影响

发布时间：2017-10-16 14:00

  本文关键词：SB203580对脾脏树突状细胞介导的OT-Ⅱ细胞增殖及分化的影响

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【摘要】：研究背景:CD4+T细胞功能失常导致的免疫性疾病发病率逐年增加,如系统性红斑狼疮、溃疡性肠炎等。CD4+T细胞功能异常有多种诱因,抗原提呈细胞是最主要因素。树突状细胞是目前已知最主要的抗原提呈细胞,能够吞噬抗原,加工处理,将抗原信息提呈给T、B细胞,从而激活机体的免疫应答。p38 MAPK信号通路作为MAPK信号通路的一个重要分支,调控细胞的生长、活化、增殖和凋亡。SB203580是p38 MAPK的特异性抑制剂,抑制其信号转导。本文将研究SB203580对树突状细胞的表型和功能的影响及可能机制。目的:探讨阻断p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)信号通路对脾脏树突状细胞(DC)介导的CD4+-鸡卵清蛋白转基因小鼠T(OT-Ⅱ)细胞增殖和分化的影响。方法:1应用CD11c+免疫磁珠分选C57BL/6小鼠脾脏中DC。2应用CD4+分离试剂盒从OT-Ⅱ转基因小鼠脾脏中分选出OT-Ⅱ细胞。3采用流式细胞术检测DC表面共刺激分子(CD80、CD86、CD40)、MHCⅡ分子的表达。4流式细胞术检测DC提呈组织相容性复合体Ⅱ类分子Eα链第52~68位抗原肽(Eα52-68)的能力。5 ELISA法及实时荧光定量PC R检测DC肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素1α(IL-1α)、IL-6、转化生长因子β(TGF-β)的蛋白水平和mRNA水平。6流式细胞术检测DC介导的OT-Ⅱ细胞增殖及Th1/Th2/Th17和抑制性细胞比例。结果:1经磁珠分选后获得了较高纯度的DC(90%)。2经分选试剂盒分选后获得叫高纯度的OT-Ⅱ细胞(90%)。3 SB203580降低DC表面CD80、CD86、CD40、MHC-Ⅱ的表达。4 SB203580抑制DC的抗原提呈反应。5 SB203580使DC细胞的TNF-α、IL-1α、IL-6表达下调,TGF-β表达上调。6 SB203580抑制DC介导的OT-Ⅱ细胞增殖,减少Th17细胞比例,增加抑制性细胞比例。结论:SB203580阻断p38MAPK信号通路,可能通过调控DC表面CD80、CD86、CD40、MHCⅡ的表达及其抗原提呈功能和细胞因子的合成,从而抑制DC介导的OT-Ⅱ细胞增殖及向Th17细胞的分化,促进其向抑制性细胞的分化。
【关键词】：p38MAPK 树突状细胞 细胞因子 抗原提呈 T细胞增殖 T细胞分化
【学位授予单位】：暨南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R392
【目录】：

• 摘要3-5
• Abstract5-7
• 本文常用英文缩略词7-10
• 1 前言10-19
• 2 研究目的和意义19
• 3 研究内容和技术路线19-21
• 4 材料和方法21-44
• 4.1 实验材料21-28
• 4.2 方法28-43
• 4.3 数据统计分析43-44
• 5 结果44-56
• 5.1 分选后获得高纯度DC44
• 5.2 分选后获得高纯度的OT-Ⅱ细胞44-45
• 5.3 SB203580及LPS最佳处理浓度45-46
• 5.4 p38MAPK磷酸化检测46
• 5.5 SB203580抑制DC的成熟表型46-49
• 5.6 SB203580抑制DC抗原提呈功能49-50
• 5.7 SB203580抑制DC分泌炎性因子，促进抑炎因子的表达50-52
• 5.8 SB203580抑制DC介导的OT-Ⅱ细胞增殖52-53
• 5.9 SB203580降低IL-17+CD4+T细胞比例，，增加抑制性细胞比例53-55
• 5.10 SB203580增加Treg细胞百分比55-56
• 6 讨论56-60
• 7 结论60
• 8 展望60-61
• 9 参考文献61-73
• 10 在校期间发表文章73-74
• 11 致谢74

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本文编号：1043054