抗人CA125单克隆抗体的制备、鉴定及化学发光体系的建立

发布时间：2017-10-16 16:26

  本文关键词：抗人CA125单克隆抗体的制备、鉴定及化学发光体系的建立

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【摘要】：目的制备抗人糖抗原125(CA125)单克隆抗体(mAb),并建立化学发光免疫分析法检测体系。方法将人CA125抗原免疫小鼠,通过细胞融合、筛选后得到杂交瘤细胞株。经细胞扩大培养及纯化获得mAb,鉴定其特异性、纯度、亚型及效价,并建立双抗体夹心ELISA。分别对包被缓冲液、包被浓度和加样模式进行优化和选择后,建立化学发光免疫分析法检测体系,并对其进行评估和血样的测定。结果获得3株抗人CA125的杂交瘤细胞株(30-1-4、31-1-5、43-1-6),不与CA199、CA50、CA724交叉,效价在1∶108以上,用30-1-4和31-1-5建立的化学发光免疫分析法经优化后,检测范围为0~1 000 U/mL,最低检测限为0.72 U/mL,与罗氏试剂检测结果的相关系数大于0.90。结论成功制备了抗人CA125 mAb,建立并优化了人CA125的化学发光免疫分析法检测体系,为CA125检测及卵巢癌的诊断奠定了基础。
【作者单位】： 东北林业大学生命科学学院;大庆麦伯康生物技术有限公司;东北林业大学大庆生物技术研究院;
【关键词】： CA 单克隆抗体 夹心ELISA 化学发光免疫分析法
【基金】：黑龙江省发展高新技术产业专项资金(FW11C201) 黑龙江省应用技术研究与开发计划项目(GC13C122)
【分类号】：R392.11
【正文快照】： 卵巢癌的死亡率高居妇科癌症首位,严重威胁女性健康。但由于卵巢的胚胎发育、组织解剖及内分泌功能较复杂,因此早期诊断卵巢癌比较困难[1-2]。发现卵巢癌时70%患者已属晚期,5年生存率仅为20%~30%。因此寻找完善的早期诊断方法对卵巢癌患者的诊断和指导治疗有重要意义。糖抗原1

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 张晓磊;聂玉哲;蓝兴国;李玉花;;抗人Apo B_(100)单克隆抗体的制备及夹心ELISA检测方法的建立[J];细胞与分子免疫学杂志;2012年07期

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 王莹;续薇;;血清人附睾分泌蛋白4联合CA125检测对卵巢癌的诊断价值[J];中国实验诊断学;2013年11期

中国博士学位论文全文数据库 前1条

1 冯莉苹;卵巢癌铂类耐药标记蛋白Annexin A3化学发光试剂盒的研制及其在临床应用中的研究[D];北京协和医学院;2012年

中国硕士学位论文全文数据库 前3条

1 贾亮;桦木醇诱导卵巢癌细胞CAOV3细胞凋亡机制的研究[D];延边大学;2013年

2 金夏;CA125介导上皮性卵巢癌患者肿瘤细胞免疫逃逸机制的研究[D];安徽医科大学;2013年

3 王素兰;血清HE4和CA125联合检测在卵巢癌中的临床意义[D];南昌大学医学院;2013年

【二级参考文献】

中国期刊全文数据库 前3条

1 李红敏;许青霞;孙萍;;血清CA125检测对卵巢癌诊断的意义[J];肿瘤基础与临床;2007年05期

2 李巍,崔恒,冯捷,李艺;卵巢癌诊断的研究进展[J];中华妇产科杂志;2005年07期

3 李山,秦雪,何卫华;血清CA125在卵巢癌诊断中的价值及文献评价[J];中华检验医学杂志;2005年02期

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 王育才;张殿忠;何立宏;丁勇;单乐群;;检测肌糖蛋白C夹心ELISA方法的建立及初步应用[J];细胞与分子免疫学杂志;2011年06期

2 童铁钢;白宇;张维军;王群;刘光亮;徐树兰;吴东来;;检测马白细胞介素-18双抗体夹心ELISA方法的建立[J];细胞与分子免疫学杂志;2009年04期

3 贾伟;王玉炯;许崇波;徐方;;抗大肠杆菌耐热性肠毒素ST1 McAb杂交瘤细胞系的建立及应用[J];免疫学杂志;2006年01期

4 董邦权，李恩善，韦强，杨琨，刘]，白钢，金伯泉，雷祚荣，郑玉玲;抗D型葡萄球菌肠毒素单克隆抗体的研制及其初步应用[J];细胞与分子免疫学杂志;1995年Z1期

5 车莹;李校X;胡培声;颜江华;姚娜;蔡琳;林绍强;王生育;朱佳男;;重组人碱性成纤细胞生长因子单克隆抗体的制备、鉴定及初步应用[J];免疫学杂志;2011年06期

6 谢鑫,曹云新,王薇,薛江楠,欧阳为明,王春艳,金伯泉;LAIR-2单克隆抗体的制备、鉴定和夹心ELISA方法的建立[J];现代免疫学;2004年01期

7 刘雪松，，金伯泉，许辉，朱勇，孙忱，李琦;抗重组人肿瘤坏死因子－α单克隆抗体的研制及其初步应用[J];细胞与分子免疫学杂志;1995年02期

8 郭建巍;王顺涛;郭黎明;冯健男;马骢;沈倍奋;;重组蓖麻毒素A链的原核表达和单克隆抗体的制备、鉴定及应用[J];免疫学杂志;2007年04期

9 钟述猷;由单克隆抗体确定的人类T淋巴细胞—新亚类的分离及其部分特征[J];国际免疫学杂志;1983年05期

10 陈善华;;用于诊断试验和亲和层析的单克隆抗体;抗体工程的初步阶段[J];国际生物制品学杂志;1983年03期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 李振宇;赵益明;董宁征;沈飞;阮长耿;;抗FⅧ-C2区单克隆抗体的制备及鉴定[A];第11次中国实验血液学会议论文汇编[C];2007年

2 陶薇;杨连华;何卓晶;洪艳;陈勇;;抗戊型肝炎病毒重组蛋白单克隆抗体的制备和鉴定[A];浙江省医学会医学微生物与免疫学及医学病毒学学术年会论文汇编[C];2009年

3 马翠卿;郭奕阳;顾海燕;曾瑞红;杨丽娟;魏林;;一株抗A族链球菌表面蛋白Fba的单克隆抗体对应的表位与Fba结合调节蛋白FH的位点重叠[A];河北省免疫学会第六次免疫学大会资料汇编[C];2010年

4 杜雪梅;唐丽;任飞W

本文编号：1043725