抗单端孢霉烯族T-2毒素单克隆抗体的制备及鉴定
本文关键词:抗单端孢霉烯族T-2毒素单克隆抗体的制备及鉴定
【摘要】:通过将T-2毒素与戊二酸酐在吡啶中反应生成T-2HG中间体(TLC验证大部分的T-2毒素都已转化为T-2HG),然后采用活泼酯法将T-2HG中间体和载体蛋白BSA/OVA共价偶联,紫外扫描结果显示偶联成功。以合成的BSA偶联物(T-2HG-BSA)作为免疫原,免疫Balb/c小鼠,经细胞融合,采用改进的半固体培养基和两步筛选法共筛选到5株性能良好的单克隆细胞株,分别是4F12、2B5、2G7、1D7和4F3。其中2G7所分泌抗体的灵敏度(IC50)0.83μg/kg,分泌抗体的性能稳定,而且与ZEN、AFB1、OTA、DON均无交叉反应或交叉反应率很低。本研究为研发粮油产品中T-2毒素特异性免疫分析技术及产品奠定了重要基础。
【作者单位】: 中国农业科学院油料作物研究所;农业部油料作物生物学与遗传育种重点实验室;农业部生物毒素检测重点实验室;农业部油料产品质量安全风险评估实验室;农业部油料及制品质量监督检验测试中心;
【关键词】: T-毒素 单克隆抗体 人工抗原 灵敏度
【基金】:国家自然科学基金资助项目(31171702,3110-1299) 国家农业行业科技专项资助项目(201203094,2012-03037) 国家科技支撑计划资助项目(2012BAB19B09)
【分类号】:R392
【正文快照】: 近年来国内外食品安全问题频繁发生,由真菌毒素污染引发的食品安全事件备受关注。单端孢霉烯族毒素是由寄生在多种农作物上的镰刀菌属霉菌在一定条件下产生的一类倍半萜烯类化合物[1],根据化学结构的不同可以分为A、B、C和D4类。T-2毒素(4,15-二乙酰氧基-8-(异戊酰氧基)-2,13
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,本文编号:1045769
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