11型HPV E7蛋白的表达及其多克隆抗体的制备

发布时间：2017-10-17 06:34

  本文关键词：11型HPV E7蛋白的表达及其多克隆抗体的制备

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【摘要】：目的构建人11型乳头瘤病毒(HPV 11)E7蛋白的原核表达载体,表达纯化后制备抗HPV11E7蛋白的多克隆抗体。方法构建pGEX-4T2-HPV11E7原核表达载体,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导大肠杆菌表达可溶性融合蛋白GST-HPV11E7,纯化获取11型HPVE7蛋白。将HPV11E7蛋白免疫新西兰大白兔获得抗HPV11E7的多克隆抗体,用蛋白G琼脂糖纯化获得IgG型多克隆抗体。Western blot法及免疫荧光染色检测该抗体的效价及特异性。结果 SDS-PAGE结果显示,经IPTG诱导6 h后可表达出高水平可溶性GST-HPV11E7融合蛋白。纯化后免疫新西兰大白兔获得抗HPV11E7的血清,纯化获得了IgG型多克隆抗体。Western blot及免疫荧光染色结果显示,兔抗HPV11E7 IgG具有效价高和特异性强的特点。结论成功表达了HPV11E7蛋白并制备了效价较高、特异性较好的IgG型兔抗HPV11E7蛋白多克隆抗体。
【作者单位】： 浙江大学医学院附属邵逸夫医院皮肤科;浙江大学医学院附属邵逸夫医院生物医学研究中心;浙江大学医学院附属第二医院临床医学研究中心;
【关键词】： 人乳头瘤病毒 E蛋白 原核表达 多克隆抗体
【基金】：国家自然科学基金面上项目(81071302);国家自然科学基金青年基金(81000698) 浙江省卫生高层次创新人才培养计划(2007年)
【分类号】：R392
【正文快照】： 人乳头瘤病毒(human papilloma virus,HPV)是一种双链DNA病毒,约有200余种亚型。根据病毒的基因组结构、生物学特性和致病性,可分为五大类,即α、β、γ、μ和ν,6型和11型HPV是低危型,属于α乳头瘤病毒,超过90%的生殖器疣是由此类HPV引发的[1]。11型HPV主要感染鳞状上皮,导致

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本文编号：1047337