瓦勒变性坐骨神经段对大鼠BMSCs向SCs分化的影响

发布时间：2017-10-17 12:38

  本文关键词：瓦勒变性坐骨神经段对大鼠BMSCs向SCs分化的影响

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【摘要】：目的:通过观察瓦勒变性坐骨神经段对大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)增殖、分泌功能以及向施万细胞(Schwann cells,SCs)分化的影响,探讨其在BMSCs向SCs分化中的作用及可能的机制。方法:采用全骨髓贴壁法分离、培养SD大鼠BMSCs,并采用免疫荧光法鉴定。应用Transwell建立坐骨神经段与BMSCs双层培养体系,将实验分为瓦勒变性坐骨神经段与BMSCs联合培养组(A组)、正常坐骨神经段与BMSCs联合培养组(B组)和BMSCs单独培养组(C组)。倒置相差显微镜观察联合培养过程中BMSCs形态变化;免疫荧光染色检测联合培养第7天各组BMSCs表达S-100情况;联合培养第0、1、4、7、11、14天,利用细胞计数法绘制各组BMSCs生长曲线,ELISA法检测各组培养液上清中神经生长因子(nerve growth factor,NGF)含量,实时荧光定量PCR检测各组BMSCs中S-100 mRNA表达情况。结果:成功分离培养BMSCs,免疫荧光鉴定BMSCs呈CD29、CD44和CD90表达阳性。联合培养第7天倒置相差显微镜观察可见,A组BMSCs胞体回缩,呈梭形,并带有突起,形态类似SCs;B、C组大部分BMSCs形态无明显变化。联合培养第7天免疫荧光染色示,A、B、C组BMSCs S-100阳性表达率分别为31.1%±2.9%、16.2%±1.7%和0.42%±0.07%,A组阳性表达率明显增高(P0.05)。各组BMSCs生长曲线均近似"S"形,从第4天开始,A组BMSCs增殖速度明显快于B、C组(P0.05);ELISA法检测示,A组NGF含量呈时间依赖性增加,于联合培养第7天达高峰,随后呈下降趋势。B、C组NGF含量随共培养时间延长有所增加,但显著低于A组(P0.05);实时荧光定量PCR检测示,联合培养第4、7、11、14天,A组S-100 mRNA表达明显高于B、C组(P0.05)。结论:瓦勒变性坐骨神经段能有效促进大鼠BMSCs增殖并诱导BMSCs向SCs样细胞分化,联合培养过程中NGF可能参与BMSCs向SCs分化的调控。
【作者单位】： 牡丹江医学院;牡丹江医学院红旗医院;
【关键词】： 瓦勒变性 坐骨神经 骨髓间充质干细胞 施万细胞 分化
【基金】：牡丹江市科学技术计划(No.G2011s0018) 黑龙江省普通高等学校青年学术骨干资助项目(No.1253G061)
【分类号】：R3416
【正文快照】： 外周神经损伤修复和神经残端支配区功能重建一直是临床面对的难题。周围神经损伤后其远端神经纤维全长及近端长度不等的髓鞘和轴突发生瓦勒变性,随后,施万细胞(Schwanns cells,SCs)呈现幼稚化而重新获得分裂增殖能力,参与清除轴突溃变碎片,并在基底膜管内形成Bunger带,形成新

【共引文献】

中国重要会议论文全文数据库 前1条

1 杨玮春;史鹤;胡敏予;;缺血对大鼠血清及脑S100B蛋白表达的影响[A];中国老龄化与健康高峰论坛论文汇编[C];2014年

【相似文献】

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1 杨建平;王黎明;徐燕;王劲松;王雁;;辛伐他汀联合BMSCs治疗激素性股骨头坏死的实验研究[J];中国修复重建外科杂志;2008年03期

2 于泽洋;于涛;赵长福;王志申;;脑源性神经生长因子修饰的BMSCs向成骨细胞诱导分化的研究[J];中国实验诊断学;2013年03期

3 刘瑾春;刘霞;曹谊林;;体外诱导BMSCs向软骨分化的方法研究进展[J];中国修复重建外科杂志;2011年05期

4 陈雷;胡秀年;傅冷西;叶君健;;非接触性共培养BMSCs和髓核细胞时间差异性的实验研究[J];中国修复重建外科杂志;2012年11期

5 朱金海;陈燕凌;;慢病毒介导人肝细胞生长因子基因感染BMSCs的实验研究[J];中国修复重建外科杂志;2010年08期

6 赵U，

本文编号：1048923