连续传代培养对hUC-MSCs上NLR家族mRNA表达的影响

发布时间：2017-10-20 08:20

  本文关键词：连续传代培养对hUC-MSCs上NLR家族mRNA表达的影响

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【摘要】：目的:探讨连续传代培养对人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)表达NOD样受体(NLR)家族所有23个成员mRNA的影响,为改进hUC-MSCs传代培养质量与增加hUC-MSCs在实验和临床应用中的数量及安全性寻找切入途径。方法:取剖宫产无菌新生儿脐带,经胶原酶II消化结合贴壁选择分离纯化hUC-MSCs,并连续传代培养;采用流式细胞术、诱导分化和RT-qPCR对连续培养传代前后的hUC-MSCs(第3和28代)进行鉴定并对23个NLR家族成员mRNA的表达进行定量分析。结果:连续传代培养前后hUC-MSCs的细胞表型均为CD29+/CD44+/CD105+/CD31-/CD34-/CD40-/CD45-/CD106-/HLA-DR-,能被诱导为成骨和脂肪细胞,符合国际细胞治疗协会建议的MSCs基本特征。全部NLR家族成员的mRNA在培养第3代hUC-MSCs上均有表达,且NOD1、NLRC4、NLRC5、NLRP1、NLRP3、NLRP10、NAIP、NLRX1和APAF1高表达,其余成员低表达。培养传代至第28代除NLRP10的mRNA表达上升、NLRC5和NLRX1 mRNA表达基本不变外,其余成员的mRNA表达均有所下降,其中NLRP1 mRNA表达差异有统计学意义(P0.05)。结论:体外连续传代培养对hUC-MSCs表达NLR家族成员的影响是多向性的。这些影响与MSCs的增殖、分化及其免疫调节功能的联系有待进一步实验探讨。
【作者单位】： 暨南大学医学院田家炳医学实验中心;暨南大学医学院血液病研究所;
【关键词】： 人脐带间充质干细胞 天然免疫受体 受体 NOD样
【基金】：国家自然科学基金资助项目(No.81100353)
【分类号】：R329.2
【正文快照】： 间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)来源于中胚层,存在于包括胚胎组织等多种成体组织内,具有多向分化和自我更新能力,可对T淋巴细胞、B淋巴细胞、树突状细胞和自然杀伤细胞等免疫系统细胞的激活、增殖以及功能产生影响;它在创伤修复、组织功能重建、免疫治疗等领域具

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本文编号：1066222