软骨细胞复合人脐带Wharton胶取向支架的体外评估

发布时间：2017-10-22 19:08

  本文关键词：软骨细胞复合人脐带Wharton胶取向支架的体外评估

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【摘要】：目的将软骨细胞复合于人脐带Wharton胶取向支架,体外评估该支架对软骨细胞的影响和作用。方法取成年新西兰大白兔肩关节软骨组织分离培养软骨细胞。取正常新生儿脐带组织,通过湿润粉碎结合化学脱细胞技术脱细胞,利用冷冻干燥及交联等技术制备人脐带Wharton胶取向支架。取第2代软骨细胞与人脐带Wharton胶取向支架复合培养,倒置显微镜、扫描电镜观察细胞在支架上分布及黏附情况;甲苯胺蓝、番红O染色观察细胞细胞外基质分泌情况;二乙酰荧光素-碘化丙啶双色荧光检测法染色及Hoechst33258染色评估细胞在支架上的活力及增殖情况;将体外PKH26荧光标记的软骨细胞与支架复合培养,荧光显微镜观察。结果倒置显微镜观察示,培养3 d细胞在支架孔隙内分布较均匀,呈圆形或椭圆形;扫描电镜观察示,培养7 d大量细胞黏附于支架孔隙间,呈圆形或椭圆形,且细胞沿取向孔道伸展排列,相互聚集,增殖旺盛;组织学观察示,培养7 d,细胞在支架中分布均匀且增殖旺盛,细胞分泌大量细胞外基质,取向支架能引导细胞迁徙和增殖,并能有效保留和促进细胞外基质分泌;细胞活力评估结果示,培养3 d见支架上黏附的大部分细胞为活细胞,细胞成活率高达90%以上。荧光显微镜观察示,荧光标记细胞与支架复合培养1 d,细胞在支架内部均匀分布,增殖旺盛。结论人脐带Wharton胶取向支架具有良好的亲和性和细胞相容性,有利于软骨细胞黏附和增殖,细胞存活率高,是一种比较理想的软骨组织工程支架材料。
【作者单位】： 佳木斯大学附属第一医院骨外一科;解放军总医院骨科研究所;
【关键词】： 软骨组织工程 人脐带Wharton胶 取向支架 软骨细胞
【基金】：黑龙江省大学生创新创业训练资助项目(201310222006) 国家级大学生创新创业训练资助项目(1110150221) 国家高技术研究发展计划(863)资助项目(2102AA020502)~~
【分类号】：R329
【正文快照】： 关节软骨无血管、神经支配及淋巴回流,损伤后再生能力有限。组织工程技术的兴起为关节软骨损伤修复带来了希望。近年有研究发现[1],脐带Wharton胶富含透明质酸、糖胺聚糖及胶原等成分,是一种无血管、神经支配及淋巴回流的组织,且脐带Wharton胶富有弹性以保护脐带血管,无论在成

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本文编号：1079678