天然免疫分子LILRB5慢病毒稳定转染THP-1细胞系的构建

发布时间：2017-10-26 17:28

  本文关键词：天然免疫分子LILRB5慢病毒稳定转染THP-1细胞系的构建

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【摘要】：目的构建天然免疫分子LILRB5的慢病毒表达载体,获得稳定转染LILRB5的单核细胞系。方法将LILRB5构建入真核表达载体pEGFP-flag,瞬时转染293T细胞系,通过免疫荧光和流式细胞术检测LILRB5-GFP和LILRB5-flag在293T细胞中的表达。构建慢病毒表达载体pHR-LILRB5,与p8.91和pMD共同转入293T细胞,产生标记有绿色荧光的LILRB5慢病毒,感染单核细胞系THP-1后通过流式细胞术检测LILRB5的表达。结果测序显示真核表达载体pEGFP-LILRB5-flag的序列与预期相符,瞬时转染pEGFP-LILRB5-flag的293T细胞可检测到绿色荧光蛋白的表达,流式细胞术检测显示LILRB5-flag在细胞膜表面有表达;构建亚克隆慢病毒载体pHR-LILRB5,经测序验证后,转染293T细胞,产生LILRB5的慢病毒,并感染THP-1细胞,流式细胞术检测LILRB5在THP-1细胞稳定表达。结论构建LILRB5的慢病毒载体,通过LILRB5慢病毒感染建立LILRB5的稳转THP-1细胞系。
【作者单位】： 济南大学医学与生命科学学院;山东省医学科学院基础医学研究所;
【关键词】： 绿色荧光蛋白 LILRB 单核细胞 慢病毒 转染
【基金】：国家自然科学基金项目(No.81101605,81172792) 山东省自然科学基金项目(No.ZR2010HQ034,ZR2009CL014) 山东省科技发展计划项目(No.2010GSF10210) 山东省医药卫生科技发展计划项目(No.2011QZ021) 山东省优秀中青年科学家科研奖励基金项目(No.BS2009YY008)
【分类号】：R373
【正文快照】： ***白细胞免疫球蛋白样受体B5(leukocyte immuno-globulin-like receptor B5,LilrB5),又称白细胞免疫球蛋白样受体8(leukocyte immunoglobulinlikereceptor8)、CD85c,是NK受体(一组紧密连锁的基因群)成员之一。NK细胞受体主要包括3个家族成员,它们分别是KIRs受体家族,KLRs受体

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本文编号：1099708