过氧化氢诱导BMSCs氧化衰老模型的建立及其对相关基因p16、p21、p53表达的影响
本文关键词:过氧化氢诱导BMSCs氧化衰老模型的建立及其对相关基因p16、p21、p53表达的影响
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【摘要】:【目的】探究过氧化氢(H2O2)对骨髓间充质干细胞(BMSCs)氧化应激损伤所致衰老的相关机制,摸索合适的H2O2衰老造模浓度,为后期的药物干预实验研究奠定基础。【方法】采用全骨髓贴壁法培养BMSCs,H2O2分别以100、200、300、400、500、600、700、800、1 000μmol/L浓度作用于BMSCs 2、12、24、48 h,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞代谢活力;β-半乳糖苷酶染色判断细胞衰老的建立成功与否;采用反转录荧光定量技术(RT-q real-time PCR)观察衰老相关基因p16、p21、p53表达水平的变化。【结果】当H2O2浓度700μmol/L时,BMSCs凋亡明显升高,而H2O2浓度400μmol/L时,变化不明显,甚至有刺激BMSCs增殖的作用;以500μmol/L H2O2作用BMSCs 24 h后,β-半乳糖苷酶染色阳性率显著增加,p21、p16、p53基因表达显著升高,差异均具有统计学意义(P0.05或P0.01)。【结论】以500μmol/L H2O2浓度作用于BMSCs 24 h后,可造成BMSCs氧化损伤衰老模型,并可使衰老相关基因p16、p21、p53表达上调。
【作者单位】: 广州中医药大学第二临床医学院;广东省中医院骨科;广东省惠州市惠阳区中医院;河南省长葛市人民医院;
【关键词】: 过氧化氢 骨髓间充质干细胞/病理学 氧化应激 衰老 细胞培养
【基金】:国家自然科学基金资助项目(编号:30772817)
【分类号】:R363
【正文快照】: 随着社会迅速步入老龄化,氧化应激作为一个健康威胁的因素越来越受到人们的重视。当机体内抗氧化和促氧化系统平衡失调,会导致生成有毒的活性氧(reactive oxygen species,ROS)[1]。ROS直接调控衰老相关的信号通路,促进机体衰老的发生[2]。骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal s
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【共引文献】
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【二级参考文献】
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