双分子荧光互补系统分析S-periaxin蛋白的聚合

发布时间：2017-10-31 02:21

  本文关键词：双分子荧光互补系统分析S-periaxin蛋白的聚合

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【摘要】：S-periaxin蛋白是施旺氏细胞特异性表达的一种蛋白,在维持髓鞘的稳定方面发挥重要作用,该蛋白基因的突变引起腓骨肌萎缩症4F亚型的发生。Periaxin基因由于mRNA剪切方式的不同可以编码两种长短不同的含PDZ结构域的蛋白,即L-periaxin和S-periaxin。两种蛋白在施旺氏细胞的定位存在明显的差异,相对L-periaxin而言,S-periaxin无论是分子结构还是生物学功能均未见相关研究。该文从大鼠的施旺氏细胞系RSC96克隆了S-periaxin基因,构建了原核表达载体pETM-3C-S-periaxin,在大肠杆菌中进行重组表达,经Ni-NTA亲和柱和Sephacryl S-200凝胶层析柱获得电泳纯的目的蛋白。体外戊二醛交联分析蛋白的聚合状态表明,S-periaxin蛋白在体外易于形成不同聚合度的聚合物。免疫共沉淀也表明,S-periaxin蛋白存在同源蛋白间相互作用。另外,构建了原、真核双分子荧光互补系统,并利用该系统分析了细胞内S-periaxin蛋白间的相互作用。
【作者单位】： 化学生物学与分子工程教育部重点实验室 山西大学生物技术研究所;
【关键词】： periaxin 施旺氏细胞 戊二醛交联 免疫共沉淀 双分子荧光互补
【基金】：国家自然科学基金(批准号:31170748)资助的课题~~
【分类号】：R3416
【正文快照】： 髓鞘是包裹在轴突外面的一层膜,其作用是保护神经元并使神经冲动在神经元上得到快速传递。在周围神经系统中,成串排列的施旺细胞以1:1的关系呈螺旋状包裹轴突,形成类似同心圆板层“髓鞘”。成熟的髓鞘由蛋白质和脂类组成,目前已经鉴定了小鼠坐骨神经髓鞘的545种蛋白,其中P0、p，

本文编号：1120382