活细胞成像技术实时追踪荧光蛋白标记的分枝杆菌的胞内增殖

发布时间：2017-11-05 15:28

  本文关键词：活细胞成像技术实时追踪荧光蛋白标记的分枝杆菌的胞内增殖

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【摘要】：目的利用绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)标记和活细胞显微成像的方法,实时追踪分枝杆菌在巨噬细胞内的增殖过程。方法用经GFP标记的野生型海分枝杆菌(Mycobacterium marlrlum,Mm)分别侵染未激活和γ-干扰素激活的巨噬细胞,使用活细胞显微成像系统连续记录胞内分枝杆菌的增殖动态,同时优化不同细胞接种浓度和感染复数(multiplicity of infection,MOI)对胞内菌增殖动态的追踪效果。结果使用GFP标记和活细胞成像的方法可以实时追踪胞内分枝杆菌的增殖过程和形态学变化。γ-干扰素对Mm在巨噬细胞中的增殖有抑制作用。当接种巨噬细胞浓度为1×10~5/孔,MOI为1时,可直观清晰地分析实时追踪图像中胞内菌的增殖过程。结论通过活细胞成像技术分析荧光蛋白标记的分枝杆菌.可实时追踪巨噬细胞内分枝杆菌增殖过程和形态学变化,是一种体外分析胞内分枝杆菌增殖的理想方法,可应用于其他相关病原菌和宿主相互作用及影响因素的研究。
【作者单位】： 复旦大学基础医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室;北京东胜创新生物科技有限公司分子影像部;
【基金】：国家自然科学基金青年项目(81201256) supported by the Youth Program of National Natural Science Foundation of China(81201256)
【分类号】：R378.91
【正文快照】： 分枝杆菌属是一类细长略弯的杆菌,其分裂方 殖动态追踪效果的影响。式为分枝状二分裂,由于分枝杆菌复杂的细胞壁结构和基因功能研究方法的匮乏,对其致病机制的研 材料和方法究进展相对缓慢1“1—2]。海分枝杆菌(Mycobacteriummarinum,Mm)与结核分枝杆菌遗传背景极为相 菌株与

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 俞索静;肖鲁伟;吴承亮;童培建;;破骨细胞血系起源的活细胞成像观察[J];中国骨伤;2012年04期

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 于翔;陆佳嘉;王秦;于晓Y，

本文编号：1144812