MicroRNA-338-3p真核表达载体的构建及其对胃癌细胞SGC-7901增殖的影响

发布时间：2017-11-08 23:34

  本文关键词：MicroRNA-338-3p真核表达载体的构建及其对胃癌细胞SGC-7901增殖的影响

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【摘要】：目的构建microR-338-3p(miR-338-3p)过表达载体并探究其对人胃癌SGC-7901细胞系体外增殖的影响。方法以pcDNATM6.2-GW/EmGFP-miR真核表达载体为基础,经EcoRⅠ和HindⅢ双酶切和纯化后与人工合成miR-338-3p的寡聚核苷酸进行连接,转化至E.Coli Top10后,经过DNA测序、BLAST检测及验证;将构建成功的载体瞬时转染入SGC-7901细胞系中,应用Real-time PCR检测miR-338-3p的表达水平,利用MTT法检测细胞增殖的改变。结果测序验证成功构建了miR-338-3p的真核表达载体;瞬时转染SGC-7901细胞后miR-338-3p表达水平有显著增加,能够抑制SGC-7901细胞的体外增殖。结论成功构建了miR-338-3p的真核表达载体,获得了瞬时表达miR-338-3p的人胃癌SGC-7901细胞系,初步证实miR-338-3p过表达可抑制肿瘤细胞的增殖。
【作者单位】： 西安交通大学医学院遗传学与分子生物学系;西安交通大学医学院第一附属医院肝胆外科;西安交通大学医学院心血管研究中心;
【基金】：国家自然科学基金资助项目(No.81171398) 陕西省科技攻关项目重大科技专项(No.2010ZDKG-50)~~
【分类号】：R346
【正文快照】： 微小RNA(microRNA,miRNA)是一类进化上高度保守的单链非编码RNA小分子,是LEE等[1]于1993年在秀丽小杆线虫的研究中发现的,其长度约为21~25nt,广泛存在于真核生物中,大部分由基因的内含子部位剪切产生。目前的研究表明,miR-NA分子通过两种[2-3]不同机制调节蛋白的表达,当miRNA

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前10条

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10 徐t，

本文编号：1159362