新生SD大鼠皮质神经元缺氧模型的改进

发布时间：2017-11-09 12:01

  本文关键词：新生SD大鼠皮质神经元缺氧模型的改进

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【摘要】：目的建立更加科学且简易的新生SD大鼠皮质神经元缺氧模型的方法。方法取24 h内的新生SD大鼠皮质,用木瓜酶和DNaseⅠ共同消化,10%FBS的DMEM/F12培养液终止消化,用10%FBS的DMEM/F12种植培养,4 h后换成无血清neurobasal配制的维持培养液,未加入阿糖胞苷培养,允许部分胶质细胞生长,第9天用免疫荧光法鉴定神经元的纯度,7~10 d用于缺氧模型,在37℃、无糖DMEM、高纯N2环境中缺氧1~6 h,观察皮质神经元缺氧后形态学的变化,根据实验目的选择最适合的缺氧时间,建立缺氧模型。结果培养第10天,神经元胞体饱满,结构清晰完整,神经元纯度荧光鉴定结果为82.04%。随着缺氧时间的增加,皮质神经元胞体和突起逐渐经历水肿到裂解的过程。结论有部分胶质细胞的生长,建立了更加科学且简易的新生SD大鼠皮质神经元缺氧模型。
【作者单位】： 汕头大学医学院;汕头大学医学院第一附属医院儿科;
【基金】：广东省自然科学基金面上项目(编号:S2011010005065) 广东省汕头市科技计划项目(编号:汕市财教[2011]134号-180)
【分类号】：R-332
【正文快照】： 神经元细胞体外培养是神经生物学领域中应用非常广泛的科研技术[1-3],而缺氧模型在新生儿窒息方面的应用更是最基础的科研方法,以往研究者都是使用了阿糖胞苷抑制胶质细胞的生长[4-6],使得神经元的纯度得到了大大的提高,但是在新生儿窒息病理生理过程中神经元和胶质细胞是共

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本文编号：1161756