硫代磷酸酯类杀虫剂ScFv抗体库的构建与初步筛选

发布时间：2017-11-15 17:28

  本文关键词：硫代磷酸酯类杀虫剂ScFv抗体库的构建与初步筛选

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【摘要】：旨在构建硫代磷酸酯类杀虫剂单链抗体(ScFv)库,并对其进行初步筛选。采用RT-PCR法从牛血清蛋白(BSA)人工抗原免疫的Balb/C小鼠脾细胞中克隆出VH和VL基因,通过重叠延伸PCR方法将VH和VL基因拼接在一起,构建ScFv基因,与表达载体pCANTAB 5E连接后,在大肠杆菌中诱导表达。采用亲和富集法,经6轮淘筛后用酶联免疫吸附分析(ELISA)测定其活性。得到滴度为2.2×106 pfu/mL噬菌体库,ELISA检测呈阳性。说明成功表达并筛选得到鼠源抗硫代磷酸酯类杀虫剂ScFv抗体库。
【作者单位】： 西北农林科技大学农药研究所;
【基金】：国家自然科学基金项目(30900995) 陕西省科技研究发展计划项目(2011K02-07)
【分类号】：R392
【正文快照】： 硫代磷酸酯类杀虫剂作为一类有机磷类杀虫剂(Ops),是一种重要的农业生产资料,在防治害虫和增加粮食产量方面发挥了极大的作用,但由于其大量使用造成的环境问题也越来越受到人们的关注[1]。传统的仪器检测样品前处理耗时长、操作水平要求高、操作仪器价格昂贵,难以实现大批量样

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