利用HRM技术区分ob糖尿病小鼠不同基因型

发布时间：2017-11-19 20:13

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【摘要】：ob/ob小鼠是糖尿病相关研究中使用最广泛的动物模型之一,近年来,市场需求呈上升趋势。与野生型小鼠相比,其瘦素蛋白基因105号密码子发生CT点突变,导致不能产生正常的瘦素蛋白。该模型4周前外观表型与野生型无异,而ob/ob纯合子不育,因而在繁殖建系过程中,需要通过基因型鉴定纯合、杂合和野生三种基因型。该文建立了基于高分辨率溶解曲线分析(high resolution melting analysis,HRM)的基因型鉴定方法,基因型分型结果与常规PCR加酶切方法一致,也与DNA测序结果吻合;通过该方法分型后获得纯合子小鼠外观表型、血糖浓度参数符合预期。该方法较常规方法省时、高效、节省实验成本,可用于大规模ob小鼠繁殖中的基因型鉴定。
【作者单位】： 中国食品药品检定研究院;
【基金】：国家科技支撑计划(批准号:2013BAK11B02) 中国食品药品检定研究院中青年中青年发展研究基金(批准号:2012B5)资助的课题~~
【分类号】：R587.1;R-332
【正文快照】： 我国糖尿病患者数量庞大,总数已经超1亿[1],且随着人口老龄化、城市化进程加快,数量还在增加,成为国家和个人巨大的医疗负担[2]。ob小鼠是由于10 kDa的瘦素蛋白(leptin protein)基因在105号密码子发生CT的点突变,导致不能产生正常的瘦素蛋白,从而表现出肥胖、摄食过量、糖尿

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本文编号：1204757