金黄色葡萄球菌转座文库构建与持留突变株研究

发布时间：2017-11-20 21:28

  本文关键词：金黄色葡萄球菌转座文库构建与持留突变株研究

  更多相关文章： 金黄色葡萄球菌 转座子文库 持留性

【摘要】：目的利用Tn917转座子构建金黄色葡萄球菌(简称"金葡菌")转座突变文库,从构建好的文库中筛选到持留性突变菌株。方法将含有Tn917的pID408质粒电转化入金葡菌Newman株,利用高温及红霉素诱导使其发生转座作用,建立转座子文库并对其进行质量评价;通过对稳定期24 h及36 h菌液予以100 MIC达托霉素处理,之后计数活菌数目的方法,比较文库中筛选到的特定菌株T18、T18s与野生株的持留性差异。结果建立了金葡菌Newman株转座子文库,从中随机挑取19个文库子,进行转座子插入位点测定,证实其插入随机性良好。在培养24 h和36 h两个时相点,野生株、T18及T18s株之间持留性存在不同程度的差异。结论成功构建了插入随机性良好、可用于多种研究的金葡菌转座子文库,并从中得到持留性变化菌株,且不同生长时间点各株细菌之间表现出持留性差异。
【作者单位】： 第三军医大学基础医学部微生物教研室 重庆市微生物工程实验室;
【基金】：重庆市自然科学基金(CSTC2011BB5026,CSTC2011jjA10050)~~
【分类号】：R378
【正文快照】： 金黄色葡萄球菌是人类的一种重要致病菌,可产生多种毒力因子,引起全身多部位的多种感染,对人类危害甚大[1]。而金葡菌生物被膜与其致病性及感染难愈性密切相关,在其逃避宿主及抗菌药物杀伤作用中扮演重要角色[2-3]。持留菌(persister cells)是存在于某个细菌群体中一定比例的

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 孙凤军;枉前;夏培元;;临床分离金黄色葡萄球菌生物膜相关基因的PCR分析[J];第三军医大学学报;2009年15期

2 程航;曾方银;胡启文;袁文常;周人杰;张霞;袁吉振;尚伟龙;杨杰;胡珍;朱军民;饶贤才;;广州地区耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的分子分型及耐药性分析[J];第三军医大学学报;2013年08期

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 尚伟龙;胡启文;胡珍;朱军民;杨杰;袁文常;程航;袁吉振;张霞;饶青;饶贤才;;重庆地区耐甲氧西林金黄色葡萄球菌主要流行克隆更替的机制研究[J];第三军医大学学报;2014年08期

2 姜北;黎庶;胡晓梅;;持留菌研究方法的新进展[J];医学研究生学报;2014年06期

3 杨晓飞;王新玉;马梅燕;刘阳;陈瑛;王勇;贺建忠;;乳房炎源性金黄色葡萄球菌生物被膜检测及药敏试验[J];畜牧与饲料科学;2014年04期

4 李延荣;陈伟;;新疆南疆地区奶牛乳腺炎性金黄色葡萄球菌生物膜形成及其相关基因的检测[J];塔里木大学学报;2012年04期

5 钟焕;廖蕴华;;腹膜透析导管表面金黄色葡萄球菌生物膜形成情况探讨[J];社区医学杂志;2014年09期

6 李丽;杨宏军;刘代成;何洪彬;王长法;仲跻峰;高运东;;奶牛乳腺炎葡萄球菌生物被膜形成及相关基因分析[J];中国农业科学;2011年01期

7 钱燕儿;陈晓;;金黄色葡萄球菌生物膜形成能力与耐药性关系的研究[J];中国微生态学杂志;2013年03期

8 吴艳霞;熊静远;田莲田;裴晓方;Yunrong Chai;;微生物持留菌与医疗卫生[J];现代预防医学;2014年05期

9 Luigina Cellini;;Helicobacter pylori:A chameleon-like approach to life[J];World Journal of Gastroenterology;2014年19期

10 何秋莹;陈渡波;曾华;黄彬;张智贤;蔡壬辛;江晓冰;;耐甲氧西林金黄色葡萄球菌分子分型研究进展[J];中国微生态学杂志;2014年05期

中国博士学位论文全文数据库 前2条

1 王守立;纳米银骨水泥预防关节置换术后感染的实验研究[D];第二军医大学;2013年

2 Mohammad Zahra;鼻气管鸟杆菌小菌落的分离鉴定[D];中国农业大学;2014年

中国硕士学位论文全文数据库 前6条

1 李丽;牛源金黄色葡萄球菌生物被膜相关基因分析及抗生素对其影响[D];山东师范大学;2011年

2 李延荣;新疆南疆地区奶牛乳房炎性金黄色葡萄球菌生物膜形成及其影响因素的研究[D];塔里木大学;2013年

3 韩明明;绿脓杆菌比色LAMP检测法的建立及水貂出血性肺炎绿脓杆菌三价灭活疫苗的研制[D];吉林大学;2014年

4 陈强;三黄烧伤灵对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌生物膜影响的实验研究[D];内蒙古大学;2014年

5 夏粤华;替加环素对安徽地区4种多重耐药菌体外抗菌活性及其药效学评价[D];安徽医科大学;2014年

6 武侠;饥饿状态对白色念珠菌生物膜滞留菌的影响及滞留菌相关基因的单细胞分析[D];山东大学;2014年

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 俞民澍;人DNA中的类转座子因子[J];国际遗传学杂志;1986年03期

2 郑霏琴,杨蕴刘,王宗阳,洪孟民;转座子Tn4、Tn3与Tn233(CH)之间转座功能互补与转座免疫的研究[J];遗传学报;1985年05期

3 丛延广,徐启旺;利用Mini-Tn5转座子诱导弗氏枸橼酸杆菌插入突变的研究[J];第三军医大学学报;2004年13期

4 赵旺胜;顾兵;刘爱民;唐芹芳;杨鹏云;文怡;刘根焰;;肠球菌耐药性与转座子Tn916/1545的关系探讨[J];江苏医药;2007年11期

5 林宁;孙海平;;多药耐药大肠埃希菌整合子、转座子遗传标志研究[J];中华医院感染学杂志;2008年10期

6 苏兆亮;糜祖煌;孙光明;陈建国;郑东;刘嫣方;Sandoghchian Siamak;许化溪;;多药耐药鲍氏不动杆菌耐药性与转座子及插入序列遗传标记研究[J];中华医院感染学杂志;2010年20期

7 许亚丰;王春新;陈国千;耿先龙;赵琪;周丽珍;糜祖煌;;泛耐药鲍氏不动杆菌携带多种转座子与插入序列[J];中华医院感染学杂志;2011年13期

8 万海英;汤华;;基因敲除技术现状及应用[J];医学分子生物学杂志;2007年01期

9 糜家睿;黄支密;糜祖煌;;大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌traA、tnp513基因研究[J];中华医院感染学杂志;2010年03期

10 韩素贞;周俊初;陈华葵;;Tn5-Mob转座系统对紫云英根瘤菌SR72的诱变和诱动作用[J];中国微生态学杂志;1990年01期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 邹曙明;杜雪地;蒋霞云;;鱼类转座子在鱼类转基因和基因捕获中的研究[A];2010年中国水产学会学术年会论文摘要集[C];2011年

2 曹慧英;李洪杰;朱振东;王晓鸣;;玉米细菌干茎腐病菌Pantoea agglomerans致病相关基因的克隆[A];中国植物病理学会2010年学术年会论文集[C];2010年

3 曲志才;姜曰水;;山东部分地区灰飞虱mariner类转座子研究[A];中国遗传学会第八次代表大会暨学术讨论会论文摘要汇编（2004-2008）[C];2008年

4 钟仰进;杨婉莹;曹阳;黄亚东;温硕洋;劳海华;陈维春;;家蚕K1.4转座子的拷贝多态性及K1.4主拷贝的序列特征研究[A];中国的遗传学研究——中国遗传学会第七次代表大会暨学术讨论会论文摘要汇编[C];2003年

5 周明兵;梁银燕;胡娇丽;钟浩;汤定钦;;毛竹基因文库的构建及Mariner-like和PIF-like转座元件的筛选[A];第六届全国林木遗传育种大会论文集[C];2008年

6 毛国璋;康耀卫;何礼远;宋伯符;;转座子Tn5对马铃薯青枯菌的诱变[A];“植物病虫害生物学研究进展”——植物病虫害生物学国家重点实验室研究论文选[C];1995年

7 郭基涛;周旭宇;;Tn5AraOut转座子随机突变:Yersinia pestis的抗菌肽抵抗基因的鉴定[A];2010年中国科学院微生物研究所博士后学术年会暨第二届博谊论坛论文摘要集[C];2011年

8 张云峰;;小麦中转座子存在的可能性初探[A];中国细胞生物学学会第五次会议论文摘要汇编[C];1992年

9 彭于发;黄大f ;张中鸽;陈彩层;张杰;;转座子诱变及在荧光假单胞菌防病增产上的应用[A];全国生物防治学术讨论会论文集[C];1991年

10 罗一博;张力;武美玲;朱江;刘忠华;;PiggyBac转座子介导EGFP在猪体细胞和克隆胚胎中的表达[A];中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会第十五届学术研讨会论文集（上册）[C];2010年

中国重要报纸全文数据库 前10条

1 冯卫东;转座子荣居自然界最丰富基因榜首位[N];科技日报;2010年

2 本报记者 冯卫东;遗传基因中的“侵略者”[N];科技日报;2008年

3 程光胜、戴秀玉;缘悭一面廿五年[N];科技日报;2005年

4 廖宝红 记者　 刘廉君;植物核基因水平转移分子证据被发现[N];科技日报;2006年

5 主持人：彭电子 中国畜牧报专刊部主任，《东方畜牧周刊》常务副主编;为安全，饲用抗生素前景黯淡[N];中国畜牧报;2002年

6 孙迎基 编译;让新药研发随心所欲[N];医药经济报;2002年

7 郑灵巧;猪链球菌7型对四环素耐药[N];健康报;2008年

8 朴淑瑜;科学家找到大麦白粉病“元凶”[N];科技日报;2010年

9 本报记者 吴洁;太空育种地上忙[N];科技日报;2001年

10 华南农业大学 王秀梅 刘雅红;探究耐药菌株产生的诱因[N];中国畜牧兽医报;2006年

中国博士学位论文全文数据库 前10条

1 王真慧;基于全基因组重测序技术分析水稻和菰渐渗系的基因组变异[D];东北师范大学;2013年

2 王锦;水牛乳腺基因表达谱与生长激素转基因水牛的初步研究[D];广西大学;2013年

3 韩民锦;家蚕MITE转座子的鉴定、进化和功能以及家蚕转座子的进化动力学研究[D];西南大学;2013年

4 张欣城;metK对那西肽生物合成的影响和链霉菌高效转座系统的构建[D];复旦大学;2009年

5 李思圆;激光辐射诱导水稻发生可遗传DNA甲基化变异和转座子激活及其可能机制研究[D];东北师范大学;2011年

6 韩乃君;转座子介导的伪狂犬病毒重组狂犬病疫苗构建与免疫研究[D];吉林大学;2012年

7 钱叶雄;低能离子诱导玉米Mu转座子激活及DNA甲基化表观遗传机制的研究[D];安徽农业大学;2011年

8 白丁平;PiggyBac转座子介导的转E.coli半胱氨酸合成酶基因绒山羊研究[D];西北农林科技大学;2012年

9 韩延超;Tol2转座子介导的斑马鱼诱变及Grhl2对内耳发育的调控[D];清华大学;2012年

10 郑小凤;Tol2转座子介导的斑马鱼诱变及nup107突变体研究[D];清华大学;2012年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 田海霞;基于PCR方法检测转座子对拟南芥基因进化的适应性研究[D];东北农业大学;2011年

2 彭玲;植物内生生防蜡样芽孢杆菌0-9菌株转座子插入突变体库的建立及评价[D];河南大学;2011年

3 许红恩;家蚕转座子数据库BmTEdb的构建[D];西南大学;2012年

4 朱宇辰;镉抗性细菌Cupriavidus campinensis KQ46的分离鉴定及其镉抗性机制研究[D];南京农业大学;2013年

5 刘红磊;人工合成甘蓝型油菜不同世代中转座子甲基化变化规律的研究[D];西南大学;2014年

6 李帑洛;不同倍性鱼及其父母本中短散在重复序列的遗传变异与多样性研究[D];湖南师范大学;2012年

7 殷文超;一氧化氮（NO）胁迫诱导水稻转座子发生遗传和表观遗传变异[D];东北师范大学;2010年

8 杜雪地;金鱼Tgf2转座子的研究及其转基因应用[D];上海海洋大学;2011年

9 张化浩;家蚕中Tcl/Mariner转座子的全基因组鉴定及进化分析[D];西南大学;2012年

10 王丹;激光辐射诱导水稻吉粳88号可遗传DNA甲基化变异和转座子转座激活的研究[D];吉林农业大学;2011年

，

本文编号：1208611