3种获得中性粒细胞方法的比较及应用的探讨

发布时间：2017-11-25 16:10

  本文关键词：3种获得中性粒细胞方法的比较及应用的探讨

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【摘要】：目的比较诱导髓系白血病细胞株分化法、外周血分离纯化法、诱导造血干细胞定向分化法3种获得中性粒细胞的方法。方法用1μmol/L全反式维甲酸(ATRA)诱导NB4细胞分化;用红细胞裂解法结合免疫磁珠法分离纯化外周血中性粒细胞;用Percoll密度梯度离心法结合免疫磁珠法分离纯化外周血干细胞,然后用GM-CSF和G-CSF诱导粒细胞的产生。3种方法获得的细胞通过MGG染色检测细胞形态及中性粒细胞纯度,利用免疫荧光技术检测CD18蛋白的表达及胞内分布特点。结果诱导NB4细胞分化可获得约40%的中性粒细胞,从外周血分离纯化的中性粒细胞纯度约为90%,通过诱导造血干细胞定向分化可获得70%以上的中性粒细胞。免疫荧光结果显示,3种方法获得的中性粒细胞,CD18蛋白的表达强度无明显不同,也都呈现点状分布。结论红细胞裂解法结合免疫磁珠法分离纯化外周血中性粒细胞,纯度高、活性好,有利于快速检测新鲜血液样本中的中性粒细胞;诱导造血干细胞定向分化获得的中性粒细胞,活性高,可在体外维持长达几天之久,可应用于中性粒细胞长时间的体外试验。
【作者单位】： 天津医科大学基础医学院免疫学系/天津市细胞与分子免疫学重点实验室/国家教育部免疫微环境与疾病重点实验室;
【基金】：国家自然科学基金资助项目(31071217)
【分类号】：R392
【正文快照】： 中性粒细胞是体内重要的免疫细胞,中性粒细胞参与、促进炎症反应,有利于机体的免疫防御,但是炎性反应也会对机体组织产生损伤[1],因为炎症部位大量中性粒细胞释放的溶酶体颗粒不但可杀灭病原微生物,同时对自身组织细胞也有很强的细胞毒作用[2]。因此可见,中性粒细胞的凋亡有利

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本文编号：1226605