一种鸡胚发育过程脊髓神经纤维投射研究方法的建立

发布时间：2017-11-26 02:07

  本文关键词：一种鸡胚发育过程脊髓神经纤维投射研究方法的建立

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【摘要】：目的建立一种鸡胚发育过程脊髓神经纤维投射的研究方法。方法采用鸡胚带壳开窗培养技术,在鸡胚胚龄3d(E3),通过活体电转基因技术将携带有报告基因绿色荧光蛋白(GFP)的质粒(pCAGGS-GFP)准确注射到脊髓腔进行定时定位活体电转,转染后3d在体视荧光显微镜下进行观察;取出GFP阳性表达的胚胎,剥离出脊髓,从顶板处破开之后将脊髓展开,用4%多聚甲醛固定1h后,对神经钙黏蛋白(N-cadherin)进行免疫荧光染色,用4’6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)染细胞核;封片后在荧光显微镜下观察神经纤维投射情况。结果对比横向切片和脊髓展开标本,两者均观察到GFP阳性转染侧的神经元纤维穿过底板沿对侧脊髓白质区边缘投射到神经结节,在脊髓展开标本中还可观察到神经纤维穿过底板再纵向向脑部投射;而N-cadherin免疫荧光染色结果表明,GFP基因的转染对机体正常的发育无明显影响。结论本实验建立了一种鸡胚发育过程脊髓神经纤维投射的研究方法。
【作者单位】： 河南省医用组织再生重点实验室;新乡医学院生命科学技术学院;
【基金】：国家自然科学基金资助项目(31000475) 河南省教育厅科学技术研究重点资助项目(13A320866) 新乡医学院重点研究领域招标课题资助项目(ZD2011-26)
【分类号】：R-332
【正文快照】： 脊髓是脊椎动物中枢神经系统的一部分,处于椎管内,上端连接延髓是脑的延伸,两旁发出成对的 神经,分布到四肢、体壁和内脏。中枢神经是由神经管分化而来,神经管的头段分化为脑,尾段分化为脊髓。如果神经管闭合有缺陷就会引起多种类型的先天畸形,如脊柱裂,脑裂等。在神经管不同

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前5条

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5 杨慈清;石晓卫;胡阿珍;贾阳阳;郭志坤;林俊堂;;应用鸡胚活体电转GFP示踪技术观察脊髓左右两侧神经元纤维投射[J];中国免疫学杂志;2012年08期

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前5条

1 杨慈清;石晓卫;胡阿珍;贾阳阳;郭志坤;林俊堂;;应用鸡胚活体电转GFP示踪技术观察脊髓左右两侧神经元纤维投射[J];中国免疫学杂志;2012年08期

2 杨慈清;杜蕊;林俊堂;赵善廷;;鸡胚发育过程N-Cadherin和Neurofilament在脊髓中共表达模式的研究[J];中国免疫学杂志;2013年03期

3 杨慈清;李小英;付苏雷;李晗;林俊堂;;鸡胚发育过程GFP标记视顶盖神经元迁移规律及NF分布特点的研究[J];中国免疫学杂志;2013年04期

4 杨慈清;李小英;付苏雷;赵善廷;林俊堂;;鸡胚发育过程N-Cadherin和Neurofilament在视顶盖中的表达模式研究[J];中国免疫学杂志;2013年08期

5 付苏雷;杨慈清;贾阳阳;李晗;郭志坤;林俊堂;;小鼠胚胎发育过程中N-Cadherin异常表达对大脑皮层神经元迁移的影响[J];中国免疫学杂志;2013年08期

中国博士学位论文全文数据库 前2条

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【二级参考文献】

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3 潘剑;黄绍明;陈婷婷;陈峡;张亮;;大鼠小脑旁绒球的传入纤维投射[J];广西医科大学学报;2010年03期

4 孔卫国;吴晓牧;张昆南;胡国柱;丁伟荣;何丹;;诱导人骨髓间充质干细胞向运动神经元分化的研究[J];江西医学院学报;2009年09期

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6 杨琳;刘娜;杨连雪;陈亚亮;李慧;景朋;李菁锦;;应用辣根过氧化物酶逆行示踪技术观察左右侧脊神经节间纤维联系[J];中国临床康复;2005年41期

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本文编号：1228159