人脐带间充质干细胞的分离培养与鉴定

发布时间：2017-11-27 19:04

  本文关键词：人脐带间充质干细胞的分离培养与鉴定

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【摘要】：目的:建立并优化人脐带间充质干细胞分离纯化方法,并对其表面标志与多向分化潜能进行鉴定。方法:收集健康足月产胎儿脐带组织,采用组织块贴壁法进行原代培养,流式细胞仪对其表面标志进行检测,通过向成骨成脂分化对其多向分化潜能进行鉴定,RT-PCR对其干细胞特性基因Oct4、Nanog、Sox2、Nestin进行检测。结果:采用组织块贴壁法可在2周左右获得大量间充质干细胞,培养的细胞经流式细胞仪检测,高表达CD29、CD44、CD105、CD106,低表达CD34、CD45;经成骨成脂诱导2周后可分化为成骨细胞和成脂细胞,RT-PCR检测发现原代细胞表达Oct4、Nanog、Sox2、Nestin基因。结论:人脐带间充质干细胞可在体外扩增培养,具有多向分化潜能,可作为组织工程种子细胞来源。
【作者单位】： 武汉大学中南医院;湖北医药学院胚胎干细胞重点实验室;湖北医药学院基础医学院生化教研室;湖北医药学院附属太和医院检验科;
【基金】：国家自然科学基金(81070614)
【分类号】：R329
【正文快照】： 虽然胚胎干细胞具有全能性,可分化为各个胚层的细胞,但其来源还存在伦理和法律上的争议,且致瘤性目前还无法控制[1]。与胚胎干细胞相比,间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)则因具有多向分化潜能、易培养、扩增能力强、来源广等优势而被大量用于实验和临床研究。在各种

【共引文献】

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1 Zhi Li;Hanjiao Qin;Zishan Feng;Wei Liu;Ye Zhou;Lifeng Yang;Wei Zhao;Youjun Li;;Human umbilical cord mesenchymal stem cell-loaded amniotic membrane for the repair of radial nerve injury[J];Neural Regeneration Research;2013年36期

2 柴永宏;;EDTA法纯化成年大鼠许旺细胞的实验研究[J];山东大学学报(医学版);2013年11期

3 胡晶琼;欧阳为相;李慧玉;王俊峰;卢聪;张兰男;徐海波;陈莉莉;黄士昂;;间充质干细胞治疗脊髓小脑性共济失调[J];中国组织工程研究;2013年27期

4 陈妍;潘丽杰;袁杰;李天侠;;冻存脐带间充质干细胞向成骨细胞的分化[J];中国组织工程研究;2013年36期

5 聂广辰;薛岩;陈一凡;李佳铭;张浩;付振德;李宇实;石健;李景先;刘勇;;人脐带间充质干细胞生物学特性及向成骨细胞分化的研究[J];中国伤残医学;2014年06期

6 李春波;陈增淦;陈统一;张峰;周建平;;种子细胞在构建组织工程神经中的应用进展[J];中国修复重建外科杂志;2014年02期

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1 刘晓芳;诱导人胚胎干细胞向胰腺内分泌细胞分化及其机制研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2013年

2 李阳;人脂肪间充质干细胞向雪旺细胞的诱导分化及对外周面神经损伤修复的实验研究[D];北京协和医学院;2013年

3 田曦亮;基于微流控技术平台的骨髓间充质干细胞分选、诱导并促进轴突再生的实验研究[D];大连医科大学;2013年

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1 杨进;羊膜联合水凝胶及hAMSCs对大鼠腓总神经损伤的修复作用[D];遵义医学院;2013年

2 刘小慧;家兔外周血间充质干细胞的富集及生物学特性研究[D];遵义医学院;2013年

3 陈桃;hUCMSCs分化为IPCs后免疫原性的变化[D];暨南大学;2013年

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1 史军;陈锦阳;李洁;曹利红;张潇月;马小秀;陶毅;;人脐带血多能干细胞的体外分离培养及其生物学特性[J];中国初级卫生保健;2010年03期

2 王芳;谌志筠;李晓眠;;小鼠骨髓中持续携带单纯疱疹病毒Ⅰ型的初步研究[J];天津医科大学学报;2010年03期

3 姜横滨;韩剑锋;方波;;人肌源干细胞体外成骨作用的实验研究[J];齐齐哈尔医学院学报;2008年06期

4 钱丽娟;许沈华;张宗显;;大肠癌细胞体外原代培养中克服污染的探讨[J];实用肿瘤学杂志;1987年02期

5 钱丽娟;许沈华;张宗显;;大肠癌细胞体外原代培养中克服污染的探讨[J];实用肿瘤杂志;1987年02期

6 郭应禄,邢念增,张智清,俞莉章,刘漓波,朱丽华,李宏伟;人B7逆转录病毒基因转移体系的建立及在原代培养肾癌细胞中的表达[J];中华医学杂志;1998年09期

7 庞春艳,林炜,陈华,林锦峰;福建水华微囊藻粗毒素对原代培养大鼠肝细胞毒性作用的初步研究[J];海峡预防医学杂志;2004年05期

8 孙臣友,刘能保,李宏莲,张敏海,刘少纯,刘向前,程少容,李晓恒,洪小平,李辉;皮质酮对原代培养的海马神经元及其Ca~(2+)/CaMKII的影响[J];神经解剖学杂志;2005年01期

9 侯红梅,董文斌,王琼,航永伦,陈枫;谷氨酸诱导新生大鼠皮层神经元毒性损伤的作用[J];实用儿科临床杂志;2005年03期

10 罗丹;刘华钢;;原代肝细胞的分离培养及其在药物研发中的应用[J];广西科学;2006年04期

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1 王晓丽;夏花;朱宏建;高必达;;朝鲜蓟上一种萎蔫病的病原分离与鉴定[A];粮食安全与植保科技创新[C];2009年

2 廖成水;程相朝;吴庭才;张春杰;李银聚;郁川;王晓利;胡阿勇;;河南省鸡源沙门氏菌新近流行株的分离鉴定及其耐药性分析[A];中国畜牧兽医学会禽病学分会第十五次学术研讨会论文集[C];2010年

3 黄瑜;程龙飞;李文杨;苏敬良;庄向生;;鸭疱疹病毒Ⅱ型(暂定名)的分离鉴定[A];第四届中国畜牧兽医青年科技工作者学术研讨会论文集[C];2001年

4 岳华;汤承;刘群;罗薇;刘内生;杨小农;龙虎;;“鸭传染性肿头症”病毒的分离及部分特性研究[A];中国畜牧兽医学会禽病学分会第十一次学术研讨会论文集[C];2002年

5 付少才;陈万荣;周珍辉;周育森;;猫泛白细胞减少症病毒的分离与鉴定[A];全国兽医外科学第13次学术研讨会、小动物医学第1次学术研讨会暨奶牛疾病第3次学术讨论会论文集[C];2006年

6 雷爱莹;彭敏;曾地刚;李咏梅;;高效净水沼泽红假单胞菌的分离和鉴定[A];广西水产研究所论文集（2001—2005）[C];2006年

7 金曙光;霍鲜鲜;乌仁塔娜;;半干青贮中优良乳酸菌的分离鉴定[A];中国畜牧兽医学会动物营养学分会第十次学术研讨会论文集[C];2008年

8 吴忆春;魏建忠;王桂军;李郁;;超强毒鸡传染性法氏囊病病毒安徽株的分离鉴定[A];第六届全国会员代表大学暨第11次学术研讨会论文集（下）[C];2005年

9 周珍辉;陈万荣;付少才;周育森;向双云;曹授俊;;猫泛白细胞减少症病毒的诊断[A];京津冀畜牧兽医科技创新交流会暨新思想、新观点、新方法论坛论文集[C];2008年

10 李文兵;胡昌江;黄勤挽;谢秀琼;;盐炙益智仁中5-羟甲基糠醛的分离鉴定[A];中华中医药学会中药炮制分会2009年学术研讨会论文集[C];2009年

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1 葛素红;我国首次完成——神经母细胞瘤细胞原代培养[N];中国医药报;2002年

2 邵文杰;昆明植物所古植物化学研究获新进展[N];光明日报;2004年

3 中国医科院基础医学研究所 曾武威　章静波;从奥巴马松绑看干细胞热[N];健康报;2009年

4 刘霞;诱导多功能干细胞“不忘”原初组织[N];科技日报;2010年

5 李忠将邋刘雪梅;茅台集团建立我国第一个白酒微生物菌种资源库[N];经理日报;2008年

6 衡水市武邑县蔡徐农技信息中心 蔡占奎;冬季谨防鸭感冒[N];河北农民报;2008年

7 郑灵巧;我国流感病毒活动未见明显增强[N];健康报;2008年

8 河南农业大学 史莹华 博士;危机动物健康的致命“暗箭”[N];中国畜牧兽医报;2006年

9 甘肃农业大学 王锡祯 教授;猪呼吸道病综合征（PRDC）的流行动态及控制措施[N];中国畜牧兽医报;2006年

10 江苏农科院 邵国青 研究员 博士生导师;变异病原“重组武功”超强[N];中国畜牧兽医报;2007年

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1 李艳华;骨髓间充质干细胞向胰岛样细胞分化及对糖尿病治疗作用的研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2005年

2 李志勇;大鼠骨髓间充质干细胞牙向分化潜能的实验研究[D];四川大学;2005年

3 于伟泓;大鼠骨髓间充质干细胞在脉络膜新生血管微环境中分化的实验研究[D];中国协和医科大学;2007年

4 王晨光;GAP-43在骨髓间充质干细胞向神经样细胞分化过程中作用机制研究[D];吉林大学;2009年

5 王蕾;乳腺干细胞的体外药物干预及基因芯片检测[D];吉林大学;2008年

6 陈钧;中医圆道理论指导下模拟微重力对骨髓间充质干细胞分化潜能的影响[D];第四军医大学;2012年

7 李婷;人腹膜间皮细胞的原代培养与鉴定卵巢癌细胞腹膜侵袭与转移机制的研究[D];山东大学;2004年

8 程霜;石榴皮萃取物抗氧化和降血脂作用与成分研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2005年

9 赵建华;钙离子和钙调蛋白在吗啡成瘾机理中的作用研究[D];第二军医大学;2005年

10 吕本强;注射用双黄连粉针剂物质基础研究[D];第一军医大学;2007年

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1 卢彦欣;狂犬病病毒街毒株BDRV的分离鉴定及全基因组序列测定[D];吉林大学;2007年

2 蔡秀磊;鸭疫里默氏杆菌耐药性与耐药基因研究[D];山东农业大学;2007年

3 白永平;绵羊肺炎支原体的分离鉴定与敏感药物试验的研究[D];四川农业大学;2007年

4 曹娟;生物表面活性剂产生菌的分离鉴定及其对环境污染物生物降解的促进作用[D];南京农业大学;2008年

5 郁宏伟;猪伪狂犬病毒的分离鉴定及检测方法的建立[D];河北农业大学;2005年

6 马清义;大熊猫消化道正常菌群的分离鉴定及药敏性研究[D];西北农林科技大学;2006年

7 杨胜祥;金叶子的化学成分研究[D];西北农林科技大学;2007年

8 董靖;无指盘臭蛙皮表金黄杆菌分离鉴定及其胞外蛋白酶研究[D];南京农业大学;2007年

9 严泽华;鸡传染性鼻炎三价灭活疫苗的研制[D];吉林大学;2007年

10 朱子洁;石家庄地区猪链球菌的分离鉴定及其快速检测方法的建立和应用[D];河北农业大学;2008年

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本文编号：1232835