重组Ⅱ型登革病毒NS1的表达及其免疫原性的研究

发布时间：2017-12-01 10:42

  本文关键词：重组Ⅱ型登革病毒NS1的表达及其免疫原性的研究

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【摘要】：目的:表达制备重组Ⅱ型登革病毒非结构蛋白NS1,检测该重组表达蛋白的免疫原性,为检测试剂盒的研制提供基础。方法:根据Ⅱ型登革病毒NS1蛋白基因序列(GenBank登录号:NC_001474),对基因序列进行编码密码子优化后进行全基因合成,随后,经双酶切将目的片段克隆到表达载体pET28a上,通过IPTG诱导表达;表达产物经Western blot鉴定后,进一步进行蛋白纯化和透析复性,制备获得重组Ⅱ型登革病毒NS1蛋白。收获的NS1蛋白免疫小鼠,制备多克隆抗体,通过间接酶联免疫学方法测定其效价,检测其免疫原性。结果:成功构建了Ⅱ型登革病毒NS1蛋白的表达载体。Western blot显示表达的重组蛋白能够被NS1单抗特异性的结合,纯化复性后的重组蛋白在小鼠体内表现出良好的免疫原性。结论:重组表达的NS1蛋白有良好的免疫原性,为以后的NS1单克隆抗体的制备和登革病毒检测试剂盒的研制提供了良好的基础。
【作者单位】： 北京协和医学院/中国医学科学院医学生物学研究所
【基金】：国家自然科学基金面上项目(81171946) 云南省科技厅社会发展科技计划项目(2011CA016) 云南省自然科学基金(2009ZC187M,2012FB188)资助项目
【分类号】：R373
【正文快照】： 登革病毒(dengue virus,DENV)广泛流行于全球热带、亚热带以及欧洲个别地区等10多个国家和地区⑴。每年超过一亿人受感染,25亿以上的人受到威胁,目前登革病毒的传播现已经成为一个日益严重的公共卫生问题[2]。 登革病毒可以感染人类并导致严重的临床疾病⑴。临床上根据疾病严

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 李华;吴健;颜钟;罗小光;陈小刚;黄康华;陈舜兰;;2种登革热抗体检测试剂应用评价[J];中国国境卫生检疫杂志;2006年S1期

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前5条

1 李亚平;陈国才;杨瑞清;苏慧;和志宏;;瑞丽口岸17例登革热感染者流行病学调查及疫情处理[J];中国国境卫生检疫杂志;2007年05期

2 曾子倩;朱彦锋;余小平;;全球登革热流行病学概况及防控研究进展[J];成都医学院学报;2014年05期

3 陈月;任瑞文;刘建伟;;登革病毒非结构蛋白1结构及功能研究进展[J];病毒学报;2014年06期

4 冯翔宇;张华荣;刘启军;曾令聪;雷红宇;陈正明;;几种登革热抗体检测试剂的比较[J];旅行医学科学;2009年03期

5 王敬军;王丽;邓勇;余鹏搏;王勤;;陕西省调查处理输入性登革热病例的报告[J];中国热带医学;2007年09期

中国博士学位论文全文数据库 前2条

1 李孝权;登革病毒包膜E蛋白Ⅲ区抗体中和表位与功能研究[D];南方医科大学;2013年

2 ANEELA FATIMA（发提玛）;抗二型登革热病毒非结构蛋白1的单域重链抗体和单克隆抗体的制备及应用于免疫检测的比较研究[D];华南理工大学;2014年

中国硕士学位论文全文数据库 前1条

1 王金章;登革病毒2型外膜E蛋白基因DⅢ区的表达及其在血清学诊断方面的应用研究[D];福建医科大学;2013年

【二级参考文献】

中国期刊全文数据库 前5条

1 何丽娟,吴新伟,高阳,狄飚,杨卫路,陈芳,徐建敏,张玮;2002年广州地区暴发的登革热流行特点分析[J];疾病监测;2004年03期

2 卢业成,陈万山,张复春,王建,尹炽标,唐小平,杨湛,袁小珍;三种登革热抗体检测方法的临床对比研究[J];热带医学杂志;2005年05期

3 林立辉,文艺,李萌,刘建伟,李云,白志军,陈唯军,方美玉;广东潮州某部登革热、流行性乙型脑炎的监测及综合防制研究[J];中国媒介生物学及控制杂志;2005年02期

4 徐建敏,何丽娟,狄飚;登革热抗体三种检测方法的比较[J];中国人兽共患病杂志;2002年04期

5 王立军,赵卫,曹虹,龙北国;登革病毒的检测技术研究进展[J];中国人兽共患病杂志;2004年02期

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 刘文君,何政贤,林桂真;Ⅱ型登革病毒对人骨髓粒-单祖细胞生长的影响[J];临床儿科杂志;1998年04期

2 杨小猛;江丽芳;赵丹;尹悦;方丹云;;Ⅱ型登革病毒非结构蛋白1特异性T细胞系的构建和特征分析[J];中华临床医师杂志(电子版);2012年16期

3 谢荣辉;朱函坪;程胤凯;徐芳;姚苹苹;翁景清;朱智勇;;Ⅱ型登革病毒NS1基因的克隆及其在昆虫细胞中的表达[J];中国人兽共患病学报;2008年12期

4 王新帅;丘立文;潘玉先;狄飙;车小燕;;Ⅱ型登革病毒非结构蛋白NS1血清型特异性单克隆抗体的制备与鉴定[J];中国人兽共患病学报;2007年12期

5 王新帅;丘立文;狄飙;陈伟俊;潘玉先;车小燕;;Ⅱ型登革病毒非结构蛋白NS1的克隆表达及抗体制备[J];中国公共卫生;2007年12期

6 雷舜;陈炜;宋富强;王嘉丽;饶贤才;黎庶;胡晓梅;;Ⅱ型登革病毒感染对细胞波形蛋白表达及磷酸化水平调控的实验研究[J];第三军医大学学报;2011年21期

7 赵玉娇;潘s，

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