血管段孵育和原代血管平滑肌细胞培养的比较

发布时间：2017-12-01 13:20

  本文关键词：血管段孵育和原代血管平滑肌细胞培养的比较

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【摘要】：探讨微血管段孵育方法能否与原代平滑肌细胞培养一样检测蛋白表达,以用于初步的基础研究,解决原代培养耗时、不易存活的问题。分离大鼠肠系膜动脉三级以下分支,使用胶原酶和木瓜蛋白酶混合消化单个血管平滑肌细胞,获取的平滑肌细胞采用含20%胎牛血清的DMEM培养基进行培养。培养的平滑肌细胞经特异性的α-actin进行免疫组化鉴定;血管段孵育是在无菌条件下分离大鼠肠系膜动脉三级以下分支,培养基孵育72 h。分别使用不同浓度的尼氟灭酸(niflumic acid,NFA)孵育原代培养的平滑肌细胞和肠系膜三级分支血管段24 h,观察平滑肌细胞连接蛋白43(connexin43,Cx43)的变化。形态学和免疫组织化学鉴定表明,培养的原代细胞为血管平滑肌细胞。不同浓度NFA处理原代平滑肌细胞能够使Cx43表达量呈浓度依赖性下降,相对于对照组具有统计学意义(P0.01);不同浓度NFA处理血管段能够使Cx43的表达量也呈浓度依赖性下降,相对于对照组具有统计学意义(P0.01)。由此可知,观察平滑肌细胞特异性蛋白Cx43的表达情况,使用血管段孵育的方法检测结果与细胞培养的结果相似。血管段孵育简单易行,可以作为类似实验的初步研究。
【作者单位】： 石河子大学医学院生理学教研室/新疆地方与民族高发病教育部重点实验室;
【基金】：国家重点基础研究发展计划(973计划)前期研究专项(2012CB26600) 国家自然科学基金项目(31260247) 新疆兵团科技攻关计划(2010GG34) 新疆兵团医药卫生专项(2012BA021)
【分类号】：R329.2
【正文快照】： 细胞培养技术在生物、医学科学研究中的应用越来越广泛[1],但有些部位的细胞又不能够形成稳定的细胞株,如微小血管的平滑肌细胞,只能通过原代培养来进行研究。然而,细胞培养技术不仅对实验人员的经验要求很高,而且不容易掌握[2]。目前,细胞原代培养可以分为组织贴壁法和酶消化

【参考文献】

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1 周晓莉,雷寒,柳青;血管平滑肌细胞的培养及鉴定[J];重庆医学;2005年06期

2 郑辉;薛松;连锋;黄日太;胡振雷;;兔血管平滑肌细胞体外培养及生长特性研究[J];上海交通大学学报(医学版);2010年09期

3 王恩帮;钟华;罗小林;梁霄;邓峰美;司军强;何芳;;缝隙连接在同型半胱氨酸介导的高血压大鼠血管平滑肌细胞增殖中的作用[J];石河子大学学报(自然科学版);2011年04期

4 刘幸平;刘清;郑燕珊;黄展勤;;大鼠血管平滑肌细胞的培养与鉴定[J];汕头大学医学院学报;2008年03期

5 刘红梅,黄体钢;血管平滑肌细胞的培养及其在心血管疾病研究中的应用[J];实用心脑肺血管病杂志;2005年06期

6 占今舜;邢月腾;张彬;;细胞培养技术的应用研究进展[J];饲料博览;2013年01期

7 蒋学伟;马克涛;李丽;赵磊;魏丽丽;陈新燕;司军强;;微小动脉血管离体标本的直径测量技术[J];石河子大学学报(自然科学版);2013年02期

8 王宇朋;王萍;李敏;陈海平;王翠英;李虹伟;;外源性过氧亚硝酸盐对大鼠血管收缩功能的影响的研究[J];临床和实验医学杂志;2013年09期

9 丘钦英;周家国;刘玉洁;关永源;;大鼠脑基底动脉平滑肌细胞培养及功能鉴定[J];中国药理学通报;2007年11期

【共引文献】

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1 刘洪付;李京敏;李宇s，

本文编号：1241245