Tie2基因过表达对单核细胞功能的影响

发布时间：2017-12-02 03:15

  本文关键词：Tie2基因过表达对单核细胞功能的影响

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【摘要】：目的:探讨过表达Tie2基因后单核细胞功能的变化及对内皮细胞增殖、迁移、小管形成的影响,初步研究TEMs(Tie2-expressing monocytes)促血管生成的机制。方法:建立过表达Tie2单核细胞系,荧光倒置显微镜下观察U937细胞的感染情况,RT-PCR、Western blot分别检测感染后U937细胞Tie2 mRNA和蛋白水平的表达情况;实时定量PCR检测感染后空载组NC-L.V-U937和实验组TEK-L.V-U937细胞mRNA水平表达的差异;ELISA检测NC-L.V-U937和TEK-L.V-U937细胞上清中细胞因子分泌的异同;增殖、迁移、小管形成实验分别观察TEK-L.V-U937细胞对内皮细胞增殖、迁移、小管形成的影响。结果:首次建立了转染Tie2基因的单核细胞系;RT-PCR及Western blot结果显示,与空载组NC-L.V-U937细胞相比,实验组TEK-L.V-U937细胞在mRNA和蛋白水平Tie2的表达显著增加,而NC-L.V-U937细胞几乎不表达Tie2;Real time-PCR结果显示,TEK-L.V-U937细胞IL-8的表达较空载组显著增加(P0.01),IL-10的表达也有所上升(P0.05);与空载组相比,TEK-L.V-U937细胞IL-8蛋白分泌明显增多(P0.05),VEGFA蛋白分泌量也有上升的趋势(P0.05),但两组细胞几乎都无EGF的分泌;TEK-L.V-U937的条件培养基刺激内皮细胞形成的小管数较多,IL-8中和抗体能抑制内皮小管的形成;NC-L.V-U937、TEK-L.V-U937饥饿培养上清对内皮细胞的迁移作用不明显(P0.05);增殖的第3天,与空载组相比,TEK-L.VU937的条件培养基能显著地引起内皮细胞的增殖(P0.05)。结论:过表达Tie2基因后显著地增加U937单核细胞系IL-8的表达,并进一步促进了内皮细胞的增殖与小管形成。
【作者单位】： 同济大学附属第一妇婴保健院妇科;同济大学附属第一妇婴保健院转化医学研究中心;
【基金】：国家自然科学基金资助项目(No.81072136)
【分类号】：R392.1
【正文快照】： 人Tie2基因定位于9p21区域,其编码跨膜蛋白Tie2,Tie2是一种酪氨酸激酶,主要表达于内皮细胞、内皮前体细胞及造血干细胞表面,近年来又发现了一类特殊的单核巨噬细胞亚群(Tie2 expressingmonocytes/macrophages,TEMs)。与Tie2-单核细胞相比,TEMs有着显著的促血管生成能力。课题

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本文编号：1243435