EGFP-Sam68融合蛋白在HeLa细胞的表达和定位

发布时间：2017-12-03 05:14

  本文关键词：EGFP-Sam68融合蛋白在HeLa细胞的表达和定位

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【摘要】：目的克隆有丝分裂Src相关蛋白p68(Sam68)基因cDNA全长,构建Sam68真核绿色荧光蛋白表达载体,并确定其在HeLa中的表达和定位。方法提取HeLa细胞总RNA,RT-PCR扩增Sam68基因片段,经酶切鉴定及测序正确后,克隆到真核绿色荧光蛋白表达载体(pcDNA3.0-EGFP)上,并转染HeLa细胞,Western blot法检测Sam68表达,免疫荧光细胞化学染色观察其细胞定位。结果酶切和测序证实Sam68正确插入pcDNA3.0-EGFP载体中,且载体正确表达了EGFP-Sam68融合蛋白,该蛋白定位在HeLa细胞核内。结论成功构建了真核表达载体pcDNA3.0-EGFP-Sam68。
【作者单位】： 黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院;
【基金】：国家自然科学基金(31200121;31300145;31310103018)
【分类号】：R346
【正文快照】： 有丝分裂Src相关蛋白p68(src-associatedprotein p68 in mitosis,Sam68)是c-Src有丝分裂期磷酸化特异性靶蛋白,属于hnRNP K同源结构域(KHdomain)信号转导和RNA激活蛋白(signal transductionand activation of RNA,STAR)家族成员[1]。Sam68是一个多功能的Src激酶接头蛋白,与细

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本文编号：1247557