神经干细胞的单层培养及分化过程中HES1和MASH1的表达变化

发布时间：2017-12-06 13:39

  本文关键词：神经干细胞的单层培养及分化过程中HES1和MASH1的表达变化

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【摘要】：【目的】建立神经干细胞(NSC)体外培养方案,使NSC的体外可以得到增殖和分化,并检测NSC分化过程中HES1和MASH1的表达变化。【方法】无菌条件下取SD大鼠胚胎端脑,无血清悬浮培养,形成P2代神经球后,将神经球消化成单细胞,分为神经球悬浮培养和单层贴壁培养,并对两种不同培养方式下的NSC进行干性鉴定和分化能力鉴定。用不同浓度(20、40、80μg/L)的脑源性神经生长因子(BDNF)诱导NSC分化,选出最合适的浓度。用BDNF最佳诱导浓度诱导NSC分化,Q-PCR检测分化过程中HES1和MASH1的表达变化。【结果】神经球悬浮培养和单层贴壁培养均可得到的NSC;分化3 d后,在不加入任何诱导因素的情况下,单层贴壁培养的NSC能更高比例[(19.55±1.09)%]地分化为β-tubulinⅢ阳性细胞;BDNF 40μg/L能诱导出更多的β-tubulinⅢ阳性细胞[(34.17±0.60)%];在分化1、3和7 d时,Q-OCR结果表明MASH1在BDNF诱导下组较NSC和对照组表达水平明显上升。【结论】单层贴壁培养的神经干细胞更利于分化为神经元,BDNF为40μg/L时能诱导出更高比例的神经元,BDNF可以诱导MASH1在NSC分化过程中表达明显上升。
【作者单位】： 广州医科大学人体解剖教研室;南方医科大学;
【基金】：广东省自然科学基金(9151063101000016) 广州市属高校科研计划项目(2012C042) 广州医学院校青年基金(L110526)
【分类号】：R329
【正文快照】： 神经干细胞(neural stem cell,NSC)是一类可自我更新的多潜能细胞,有能力分化为神经元或神经胶质细胞,并在学习记忆和海马突触可塑性中起重要作用[1]。在成体的一生中,NSC都会经由神经发生而生成,它们可以分化、迁移,代替损伤、死亡或丢失的神经元[2]。NSC的这些性质,使它们在

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本文编号：1258809