绿色荧光蛋白转基因大鼠骨髓间充质干细胞的分离鉴定

发布时间：2017-12-09 11:38

  本文关键词：绿色荧光蛋白转基因大鼠骨髓间充质干细胞的分离鉴定

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【摘要】：背景:转基因动物提取的间充质干细胞自身携带绿色荧光蛋白,与传统病毒、质粒转染相比,能在活细胞中稳定地表达,可较快筛选其修饰的细胞。目的:观察绿色荧光蛋白转基因大鼠骨髓间充质干细胞的生物学特性。方法:取2周龄的绿色荧光蛋白转基因大鼠双侧长骨骨髓,采用全骨髓贴壁法分离培养骨髓间充质干细胞。流式细胞术分析第5代绿色荧光蛋白阳性骨髓间充质干细胞的细胞表型,并分别加入成骨及成脂条件培养液进行体外多向诱导分化,采用茜素红钙盐染色和油红O染色进行鉴定。结果与结论:成功获得了稳定表达绿色荧光蛋白的骨髓间充质干细胞,流式细胞仪检测细胞表达CD90和CD105,不表达或弱表达CD14和CD45。经成骨诱导3周后茜素红染色可见有橘红色钙盐沉积,经成脂诱导3周后油红O染色见红色的脂滴。结果表明稳定表达的绿色荧光蛋白未影响到骨髓间充质干细胞的多向分化潜能,可作为良好的示踪因子。
【作者单位】： 解放军沈阳军区总医院泌尿外科;
【基金】：辽宁省自然科学基金项目(2013020199)~~
【分类号】：R329.2
【正文快照】： 宁省本溪市人,满族,硕士,主要从事男科基础与临床研究。通讯作者:曹志强,博士,副主任医师,解放军沈阳军区总医院泌尿外科,辽宁省沈阳市1108402014.37.004[http://www.crter.org](2014)37-05923-06稿件接受:2014-08-24Wang Yang,Master,Department of Urinary Surgery,General

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本文编号：1270280