pCMV-LC3-Ag85B重组质粒DNA疫苗对结核的免疫保护作用

发布时间：2017-12-09 22:29

  本文关键词：pCMV-LC3-Ag85B重组质粒DNA疫苗对结核的免疫保护作用

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【摘要】：目的构建结核分枝杆菌Ag85B抗原基因与微管相关蛋白轻链3(LC3)基因融合的DNA疫苗,探究其抗结核分枝杆菌保护效应。方法构建pCMV-LC3-Ag85B重组质粒并转染RAW264.7细胞,Western blot法检测目的蛋白的表达水平。分别以pCMV、pCMV-Ag85B、pCMV-LC3-Ag85B质粒免疫BALB/c小鼠。末次免疫2周后,Ag85B刺激下培养各组小鼠脾脏淋巴细胞,ELISA检测IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10分泌水平。末次免疫3个月后,用H37Rv标准株尾静脉注射感染小鼠,计数肺和脾脏结核分枝杆菌载量。结果 pCMV-LC3-Ag85B在RAW264.7细胞的表达水平与质粒浓度呈剂量依赖性。与pCMV-Ag85B免疫组相比,pCMV-LC3-Ag85B免疫组的IL-2、IFN-γ分泌显著增加,而肺和脾脏内结核分枝杆菌载量降低。结论 pCMV-LC3-Ag85B可显著增强Th1型免疫应答,并显示较好的抗结核分枝杆菌免疫保护效应。
【作者单位】： 安徽理工大学医学院免疫与检验教研室;安徽理工大学免疫与感染研究所;安徽理工大学附属肿瘤医院检验科;
【基金】：国家自然科学基金(61170172,81202294,81172778,81302524) 安徽省自然科学基金(1208085QH162,KJ2013A105) 大学生创新创业训练计划项目(AH201310361188,AH201310361189,AH201310361190,201310361096)
【分类号】：R392-33;R378.911
【正文快照】： 近年来,随着感染多重耐药结核菌的患者大量出现,抗痨药物治疗结核病愈加困难,新型抗结核疫苗的研究迫在眉睫[1-2]。细胞自噬作为真核细胞中胞内成分的分解代谢途径,近些年被发现在适应性免疫中具有促进MHCⅡ类抗原提呈的作用,同时能够协调MHCⅠ和MHCⅡ的交叉提呈[3],这为通过

【参考文献】

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【共引文献】

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本文编号：1272115