NLRP3基因真核表达载体的构建和定位

发布时间：2017-12-10 02:10

  本文关键词：NLRP3基因真核表达载体的构建和定位

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【摘要】：目的:构建人NLRP3真核表达载体,并证实融合蛋白在人心肌细胞中定位。方法:以人胎脑cDNA文库为模版,PCR扩增NLRP3全长编码基因,亚克隆至p3×FLAG-cmvTM-10表达载体中。将构建的重组质粒测序并转染到人心肌细胞中,提取细胞蛋白进行Western blotting检测。利用激光共聚焦扫描显微镜观察FLAG-NLRP3在HCM细胞内定位。结果:NLRP3全长基因序列克隆到了真核表达载体p3×FLAG-cmvTM-10中,酶切鉴定片段大小3 111 bp。Western blotting检测到了融合蛋白FLAG-NLRP3表达,分子量约为114 kD。FLAG-NLRP3在人心肌细胞中表达,定位于细胞浆内。结论:成功构建了FLAG-NLRP3全长基因真核表达载体,FLAG-NLRP3蛋白主要定位于心肌细胞浆内。
【作者单位】： 中国人民解放军第202医院心血管内科;
【分类号】：R346
【正文快照】： 炎症反应是心血管疾病的重要病理过程,而炎症小体形成是调节炎症反应发生的重要部分。它能够对细菌、病毒等致病因子做出应答反应,也能够调节非感染性疾病,如风湿病、痛风等[1]。炎症小体还参与心肌梗死、再灌注损伤等心血管疾病的发病。NLR家族pyrin结构3(NLRP3)炎症小体是细

【参考文献】

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【共引文献】

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1 齐斌;任威;李春江;张锐;;人心肌细胞中NLRP3融合蛋白表达的鉴定[J];广西医学;2014年01期

中国博士学位论文全文数据库 前1条

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【二级参考文献】

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【相似文献】

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8 唐昊U，

本文编号：1272719