铜绿假单胞菌外膜蛋白OprH原核表达载体的构建与表达

发布时间：2017-12-11 09:08

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【摘要】：目的克隆铜绿假单胞菌外膜蛋白OprH基因,构建其原核表达载体并鉴定其表达。方法从铜绿假单胞菌中提取基因组DNA进行PCR扩增OprH基因;采用T-A克隆技术构建pMD19T-OprH重组质粒,并经酶切和序列测定后,获得OprH片段插入到原核表达载体pET28b中,以构建pET28b-OprH重组表达质粒,并在表达宿主菌E.Coli BL21中经IPTG诱导表达及通过SDS-PAGE电泳鉴定。结果 pET28b-OprH原核表达载体构建成功:重组表达质粒经IPTG诱导后表达外膜蛋白OprH。结论成功克隆了OprH基因并获得原核表达物,为进一步研究快速检测该菌的方法奠定了基础。
【作者单位】： 齐齐哈尔医学院免疫教研室;齐齐哈尔医学院附属第三医院烧伤科;
【基金】：齐齐哈尔市科技局指令性科研计划课题(项目编号:SF-201106)~~
【分类号】：R3416
【正文快照】： 铜绿假单胞菌为条件致病菌,是医源性感染的 61.7T。扩增的目的基因片段大小为744bp,可编主要病原菌之一,广泛分布于自然界的土壤、水、码整个OprH基因序列。空气及人体皮肤、肠道、呼吸道内。该致病菌可在 PCR扩增过程:应用50^反应体系,取由各种原因导致的人体抵抗力低下时,于

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 韩善桥,马骢,虞积耀,段蕴铀,田光,郭勇,姜福亭,李锦华,王晓东,郝秀红,蒋学斌;福建沿海海域细菌种类和分布的调查[J];中国卫生检验杂志;2003年02期

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前6条

1 黄备;闵怀;唐静亮;胡颢琰;王婕妤;魏娜;;浙江沿海海洋微生物群落的研究[J];中国环境监测;2009年02期

2 马桂珍;孔德平;王增池;暴增海;吕明生;;抗植物病原真菌海洋细菌的抗菌作用研究[J];吉林农业大学学报;2009年01期

3 阙镇如,段丛勇,郑青山,王琼珍,蔡继一,郭淑蓉;部队海训致急性外耳道炎、化脓性中耳炎28例[J];人民军医;2005年06期

4 郁毅刚;江先海;张阳根;方美华;刘磊汉;;冬季闽南海域细菌种类及药敏研究[J];人民军医;2012年03期

5 王燕;窦恒利;胡成进;;铜绿假单胞菌外膜蛋白OprF原核表达载体的构建及表达[J];山东大学学报(医学版);2010年09期

6 韩善桥;巴剑波;赵晓航;姜涛;朱智明;安怀杰;陈双红;徐雄利;何立东;;亚丁湾海域海水理化性质和主要细菌调查[J];中国卫生检验杂志;2011年08期

中国重要会议论文全文数据库 前1条

1 马桂珍;孔德平;王增池;暴增海;吕明生;;抗植物病原真菌海洋细菌的抗菌作用研究[A];江苏省植物病理学会第十一次会员代表大会暨学术研讨会论文集[C];2008年

中国博士学位论文全文数据库 前1条

1 宁浩勇;海水浸泡延迟伤口愈合的机制及救治研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2008年

中国硕士学位论文全文数据库 前2条

1 曲艳娇;海浪河下游细菌群落结构及其与理化因子相关性初步分析[D];东北林业大学;2012年

2 姜明子;重组铜绿假单胞菌外毒素Exotoxin A及Ⅲ型分泌系统PcrV基因核酸疫苗的构建及免疫保护作用的研究[D];南京医科大学;2014年

【二级参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 吴博慈;;珠海口岸海水致病性弧菌调查[J];旅行医学科学;1996年02期

2 吴玲,张景隆,倪语星,周云昌,杜源;我国沿海五省市致病性弧菌的分布调查及病原学研究[J];中华流行病学杂志;1998年05期

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 赵振国;江渝;彭家和;;人可溶性CD40L cDNA的克隆及表达[J];第四军医大学学报;2006年07期

2 张雪洋;赵华;胡飞;赵红宇;章锦才;;人釉原蛋白编码区基因原核表达载体的构建[J];上海口腔医学;2007年01期

3 韩彩云;曹秋芬;马青兰;孟玉平;;枣金属硫蛋白基因原核表达载体的构建[J];太原理工大学学报;2009年04期

4 任圣俊,蒋惠秋,顾健人;大肠杆菌胞嘧啶脱氨酶基因克隆及其原核表达载体构建、表达[J];科学通报;1997年19期

5 李德玲;张前军;顾巍;;胰岛素前体基因克隆及其原核表达载体的构建[J];汕头大学医学院学报;2014年01期

6 王森;何韶衡;魏继福;;水蛭源性类胰蛋白酶抑制剂表达载体的构建与表达[J];江苏大学学报(医学版);2008年05期

7 曹玉红;张国成;张光运;徐彦鸣;王立锋;;人β防御素4基因原核表达载体的构建及其表达[J];生物医学工程学杂志;2008年05期

8 杨学习;谢美娟;李欣;李粉霞;徐伟文;李明;;人酪氨酸激酶6原核表达载体的构建、表达、纯化与鉴定[J];免疫学杂志;2011年02期

9 曾涛;何德;;人泛素-核糖体蛋白27a原核表达载体构建及表达[J];检验医学与临床;2013年12期

10 刘磊;许淑芬;方艳秋;谭岩;;人铜锌超氧化物歧化酶原核表达载体的构建、表达及蛋白纯化[J];中国老年学杂志;2008年05期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 邬玉兰;刘志刚;;牛奶主要过敏原β-乳球蛋白基因的克隆及其原核表达载体的构建[A];中华医学会2009年全国变态反应学术会议论文汇编[C];2009年

2 刘全华;华丽;霍婧;鲍一笑;;人白介素13原核表达载体的构建及其在大肠杆菌中的表达[A];第六届江浙沪儿科学术会议暨儿科学基础与临床研究进展学术班论文汇编[C];2009年

3 刘林林;王铁君;杨艳明;苏清秀;殷胜松;张奇;龚守良;;小鼠分泌型内皮抑素原核表达载体pNZ44-ssEndostatin的构建及表达[A];中华医学会放射肿瘤治疗学分会六届二次暨中国抗癌协会肿瘤放疗专业委员会二届二次学术会议论文集[C];2009年

4 杨海杰;管宝全;罗文新;李少伟;鲜阳凌;张军;夏宁邵;;含分泌信号的原核表达载体的组建及应用[A];中国生物化学与分子生物学会第八届会员代表大会暨全国学术会议论文摘要集[C];2001年

5 彭旭;袁顺宗;王晓娟;甘成军;王庆红;陈烯伟;张小容;胡晓红;罗高兴;吴军;;人HT036蛋白的原核表达及鉴定[A];第八届全国烧伤外科学年会论文汇编[C];2007年

6 李慎涛;欧阳红生;张玉静;张锐;廖晓萍;孙博兴;张永亮;;猪肌生成抑制素基因原核表达载体的构建及其表达[A];新世纪 新机遇 新挑战——知识创新和高新技术产业发展（上册）[C];2001年

7 李慎涛;欧阳红生;张玉静;张锐;廖晓萍;孙博兴;张永亮;;猪肌生成抑制素基因原核表达载体的构建及其表达[A];中国生物化学与分子生物学会第八届会员代表大会暨全国学术会议论文摘要集[C];2001年

8 徐海燕;徐志伟;;人胰岛素样生长因子-1的原核表达载体的构建[A];山东免疫学会、山东微生物学会医学微生物学专业委员会、山东省医学会微生物学和免疫学专业委员会、山东省医药生物技术学会2001年学术年会论文汇编[C];2001年

9 李士泽;张艳宇;张玉静;;凋亡蛋白融合基因原核表达载体的构建及序列分析[A];动物生理生化学分会第八次学术会议暨全国反刍动物营养生理生化第三次学术研讨会论文摘要汇编[C];2004年

10 鲍德明;胡乃中;沈际佳;石海;许建明;;人巨噬细胞金属弹力酶催化域基因原核表达载体的构建与鉴定[A];中华医学会第七次全国消化病学术会议论文汇编（下册）[C];2007年

中国博士学位论文全文数据库 前2条

1 刘芳;1.Keap1和p65蛋白相互作用及其作用机制研究 2.Mayven不同截短体原核表达载体的构建、表达和纯化[D];重庆医科大学;2008年

2 王桂武;重组IGFBP-4蛋白的表达、纯化、晶体生长及其对鹿茸细胞增殖抑制的研究[D];中国农业科学院;2008年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 杨震;人组织型纤溶酶原激活剂原核表达载体的构建及其在大肠杆菌中的初步表达[D];重庆医科大学;2012年

2 李晓华;重组梅花鹿胸腺素β_4原核表达载体的构建及活性研究[D];长春中医药大学;2013年

3 范海鸣;大鼠寡霉素敏感相关蛋白的克隆及原核表达载体的构建[D];天津医科大学;2008年

4 王喜;重组人糖皮质激素受体原核表达载体的构建和表达[D];第二军医大学;2005年

5 徐珍珍;人胶原蛋白原核表达载体的构建及在大肠杆菌中的表达[D];吉林农业大学;2011年

6 詹辉;改良型TAT-PTD-VP3融合蛋白的基因合成、原核表达载体构建及原核表达的实验研究[D];昆明医学院;2006年

7 张云龙;一种蛋白内含子介导纯化的原核表达载体的构建及应用[D];西北农林科技大学;2004年

8 毕城伟;Kringle5基因克隆、原核表达载体构建和蛋白表达的实验研究[D];昆明医学院;2009年

9 张启波;凋亡素原核表达载体构建、表达、纯化及鉴定的实验研究[D];昆明医学院;2011年

10 钟立武;NT3原核表达载体的构建、表达及精原干细胞法制备转基因小鼠的实验研究[D];四川大学;2004年

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