Lentivirus载体对许旺细胞的转染效率

发布时间：2017-12-13 10:30

  本文关键词：Lentivirus载体对许旺细胞的转染效率

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【摘要】：背景:近年来研究较多的LV载体,因其强大的转染能力以及较高的转染效率等特点,在基因转染的实验中应用越来越广泛。目的:进一步验证Lentivirus载体在体外对原代许旺细胞的转染效率。方法:以Lentivirus三质粒系统构建病毒载体,在体外分别以MOI值为1,5,10,20,40对原代大鼠许旺细胞进行转染,转染后第1,3,5,7,9天在荧光显微镜下观察Lentivirus携带的荧光表达情况,并在显微镜的计数方格内计算细胞的转染情况。发出绿色荧光的为转染成功的许旺细胞,否则认为没有转染病毒载体的,从而算出转染效率。结果与结论:在病毒转染3 d后,在各不同MOI值的培养孔中,均能观察到极少量的荧光反应,在第5天时,荧光数量较前明显增多。第7天时达到高峰,第9天的荧光数量与第7天变化不明显。从细胞转染效率来看,不同的MOI值明显不同,MOI值为1时的转染效率约为45%,MOI值为5时为80%,MOI值为10时为90%,MOI值为20时为78%,MOI值为40时转染效率为70%。
【作者单位】： 上海市第六人民医院;上海长海医院;
【基金】：国家自然科学基金(30571887) 中国博士后科学基金(20080430663)~~
【分类号】：R329.2
【正文快照】： 0引言Introduction的37℃培养箱培养1 h后追加培养基。次日加入阿糖胞苷近十几年来,神经科学工作者对许旺细胞移植治疗脊(终浓度为10-5 mol/L),24 h后吸除含有阿糖胞苷的培养液,髓损伤进行了初步的探索[1-5],并证实许旺细胞移植可以促加入体积分数10%胎牛血清的DMEM培养液(分

【参考文献】

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本文编号：1284841