K562工程细胞联合IL-2扩增方案对人NK细胞扩增和活化的效果

发布时间：2017-12-15 03:17

  本文关键词：K562工程细胞联合IL-2扩增方案对人NK细胞扩增和活化的效果

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【摘要】：目的:评价新建立的K562工程细胞联合IL-2扩增方案对人NK细胞扩增和活化的效果。方法:采集健康志愿者和肿瘤患者的外周血PBMC并分离NK细胞,采用前期构建的K562工程细胞(将IL-15、4-1BBL和IL-18在白血病K562细胞上进行跨膜表达获取)联合IL-2培养方案对NK细胞进行扩增和活化,以流式细胞术检测NK细胞的扩增效果和NK细胞表面受体表达水平,CCK-8法检测扩增后NK细胞对肿瘤细胞的杀伤活性和ADCC活性,CCK-8法检测在培养方案扩增末期加入TKD多肽对NK细胞的活化效果。结果:对于健康志愿者的NK细胞,新建立扩增培养方案可使NK细胞在PBMC中的比例提高至(93±3)%;使NK细胞中活化性受体NKG2D、CD94、NKp30、NKp44和NKp46的比例分别提高60%、40%、20%、40%和63%,而抑制性受体的表达变化不大;扩增后NK细胞对白血病细胞K562、肺癌细胞A549、肝癌细胞SMMU-7721和乳腺癌细胞MCF-7的杀伤活性分别提高了19%、29%、26%和28%,其ADCC活性从(33±5.6)%上升至(65±12)%;方案中增加TKD可使NK细胞的杀伤活性从(86±4)%提高至(96±2)%。对于肿瘤患者的NK细胞,新扩增方案使其在PBMC的比例提高至(90.0±8.0)%,其对K562细胞的杀伤活性提高了17%左右。结论:K562工程细胞联合IL-2扩增方案可高效扩增NK细胞,明显激活其杀伤活性,扩增和活化的NK细胞可满足临床治疗的需要。
【作者单位】： 西北工业大学生命学院陕西省空间生物实验模拟技术重点学科实验室;福建医科大学附属漳州市医院血液科;
【基金】：陕西省自然科学基金资助项目(No.2014JM4171)~~
【分类号】：R392
【正文快照】： tumor cells by 19%,29%,26%and 28%respectively.In the cell preparations from cancer patients,ex vivo expansioninduce the percentage of NK cells increase to(90.0±8.0)%and the cytotoxicity against K562 cells by 17%.Conclu-sion:Co-culture with engineered K5

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本文编号：1290418