大鼠骨髓间充质干细胞的分离与培养方法优化

发布时间：2017-12-18 05:12

  本文关键词：大鼠骨髓间充质干细胞的分离与培养方法优化

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【摘要】：目的建立一个分离、培养、纯化大鼠的骨髓间充质干细胞的方法。方法使用贴壁法分离大鼠的骨髓间充质干细胞,通过培养初期的频繁换液和传代过程中减少胰蛋白酶的暴露时间,达到骨髓间充质干细胞的纯化。流式细胞仪检测细胞表面标志物,MTT法检测细胞生长状况,暴露于不同的诱导培养基使细胞成骨、成脂,并向肝胆系分化。结果分离所得的细胞阳性表达CD29、CD44、CD90,而对于造血细胞标志物CD45呈阴性。在成骨、成脂培养基的诱导下,细胞ALP、茜素红、油红O染色均呈阳性,并发现传至10代的细胞仍保持分化功能。将骨髓间充质干细胞贯续暴露于不同的细胞因子和激素,得到了表达肝细胞、胆管上皮细胞特异标志的子代细胞。结论通过改良后的方法可以高效、简洁地分离出形态均一的大鼠骨髓间充质干细胞,并能够向多胚层的细胞分化。
【作者单位】： 陕西省人民医院;西安交通大学第三附属医院肿瘤外科;延安大学医学院;西安交通大学第一附属医院肝胆外科;
【基金】：国家自然科学基金(81170455) 陕西省科技统筹创新工程项目(2011KJCL03-13)~~
【分类号】：R329
【正文快照】： 20世纪60年代,Friedenstein等[1]首先在骨髓基质间发现了间充质干细胞(MSCs)。MSCs作为一种成体干细胞,具有自我更新和多向分化的潜能。近年来研究表明,MSCs具有广泛地可塑性,暴露于不同的微环境,可使其基因重组并向全部3个胚层的细胞分化,包括肺泡上皮细胞、视网膜色素、皮肤

【参考文献】

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【共引文献】

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本文编号：1302931