大鼠β-catenin miRNA表达载体的构建及在脂肪干细胞中沉默效果的检测

发布时间：2017-12-21 10:44

  本文关键词：大鼠β-catenin miRNA表达载体的构建及在脂肪干细胞中沉默效果的检测　出处：《四川大学学报(医学版)》2014年05期 　论文类型：期刊论文

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【摘要】：目的构建具有沉默大鼠脂肪干细胞β-catenin表达的miRNA(miR)表达载体。方法通过酶切法将合成的miR表达载体寡聚核苷酸引物与质粒pSWH相连,形成pSWH-miR;PCR扩增出增强型绿色荧光蛋白(EGFP)开放阅读框,插入经双酶切处理的pSWH-miR形成pSWH-EGFP-miR。β-catenin miR表达质粒瞬时转染SD大鼠脂肪干细胞(adipose-derived stem cells derived from rats,rADSCs),72h后提取细胞全蛋白,Western blot检测β-catenin的表达情况。结果针对大鼠β-catenin的不同位点,一共构建了5个miRNA表达载体(miR-780、miR-796、miR-1467、miR-1948、miR-1960),其中miR-780、miR-796对β-catenin沉默效果最好(P0.05),miR-1960的沉默效果次之(P0.05),miR-1467、miR-1948不具有沉默效果(P0.05)。结论 miR-780、miR-796能够有效沉默SD大鼠脂肪干细胞中β-catenin的表达。
【作者单位】： 四川大学口腔再生医学国家地方联合工程实验室;四川大学口腔疾病研究国家重点实验室;四川大学生命科学学院;四川大学材料科学与工程学院;四川大学华西口腔医院儿童口腔科;四川大学华西口腔医院口腔颌面外科;
【基金】：国家高技术研究发展计划(No.2011AA030107) 国家自然科学基金(No.30973348) 四川省科技支撑计划(No.2012SZ0013、No.2012SZ0035、No.2013GZX0158及No.2013SZ0015)资助
【分类号】：R329
【正文快照】： 脂肪干细胞能够分化形成多种组织来源的细胞,如脂肪细胞、成骨细胞、软骨细胞、心肌细胞、神经细胞等,这为临床治疗组织损伤相关疾病带来了*国家高技术研究发展计划(No.2011AA030107)、国家自然科学基金(No.30973348)和四川省科技支撑计划(No.2012SZ0013、No.2012SZ0035、No.2

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