百日咳杆菌免疫学和分子生物学检测方法的建立及疫苗株基因序列分析

发布时间：2017-12-29 01:23

  本文关键词：百日咳杆菌免疫学和分子生物学检测方法的建立及疫苗株基因序列分析　出处：《中国药品生物制品检定所》2005年硕士论文　论文类型：学位论文

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【摘要】：尽管现在世界上绝大多数国家实施百日咳疫苗的免疫接种，使百日咳感染率和病死率大大下降，但据世界卫生组织(WHO)统计报道，现在全世界每年百日咳患者达数四千万之多，且绝大多数病例来自不发达国家和发展中国家，因此百日咳越来越引起人们重视。百日咳疫苗是预防和控制百日咳的最有效方法。百日咳疫苗包括全细胞疫苗和无细胞百日咳疫苗，由于全细胞疫苗所引起的接种副反应较为严重，将逐渐被接种副反应小而免疫效果好，以百日咳杆菌的两种主要抗原即百日咳毒素(pertussis toxin，PT)和丝状血凝素(filamentous hemagglutinin，FHA)为主要成分的无细胞百日咳疫苗所代替。然而在无细胞疫苗各组分的制备和质量控制等方面，目前还存在一些问题有待于研究和解决，其中之一即尚无一种很好的有效抗原定量检测方法。 本课题采用杂交瘤单克隆技术，运用已建立的间接ELISA法筛选，获得七株分泌抗百日咳毒素(PT)单克隆抗体(monoclonal antibody，McAb)的杂交瘤细胞株和六株抗百日咳丝状血凝素(FHA)McAbs的杂交瘤细胞株，两种杂交瘤细胞株分泌单克隆抗体的Ig类别均为IgG_1(κ)，效价达1：10~5—1：10~7，各株抗PT McAbs能特异性识别PT，与FHA及C型肠毒素无交叉反应，其中McAb1D4和3E4有中和抑制PT簇集CHO细胞的活性，Western blot结果表明2D7、5F9、5F8、1D4和2C25株McAbs均能识别PT抗原的S1亚单位蛋白，，McAb 1B8可识别S2亚单位蛋白，McAb 3E4可识别S3亚单位蛋白。6株抗FHA-McAbs均能特异性识别FHA，与流感病毒血凝素及PT无交叉反应，其中McAb 2C2、2G6、1EA和1C7能特异性抑制FHA血凝活性，血凝抑制效价分别为1：64，1：128，1：256
[Abstract]:......
【学位授予单位】：中国药品生物制品检定所
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2005
【分类号】：R392

【参考文献】

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本文编号：1348249