肠道外致病性大肠埃希菌产超广谱β-内酰胺酶的耐药性及基因分型

发布时间：2017-12-29 13:28

  本文关键词：肠道外致病性大肠埃希菌产超广谱β-内酰胺酶的耐药性及基因分型　出处：《福建医科大学》2006年硕士论文　论文类型：学位论文

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【摘要】： 目的:了解福建地区肠道外致病性大肠埃希菌对常用抗菌药物的耐药现状;调查本地区该菌的产超广谱β内酰胺酶情况,建立简便实用的快速检测方法;明确本地区ESBLs相关编码基因的基因型别及特征,为建立产超广谱β-内酰胺酶ExPEC的分子流行病学筛查和临床诊断方法奠定基础。 方法:对2003年~2005年间从福建地区7家医院收集的肠道外致病性大肠埃希菌用琼脂稀释法进行药敏试验。分别用终浓度为1μg/ml头孢他定和头孢噻肟对这些菌株进行ESBLs初筛,任一底物检测出现结果阳性,就采用临床实验室标准化研究所(CLSI)推荐的表型确证试验确证之。同时设计肉汤微量稀释法,先对国际标准菌株大肠埃希菌ATCC 25922 (非产ESBLs菌株)和肺炎克雷伯菌ATCC 700603(产ESBLs菌株)重复试验40次,验证其可靠性,再用该法检测59株产ESBLs菌株和33株非ESBLs菌株,以CLSI推荐的表型确证试验结果为标准,确定本研究建立的方法的真实性。用脉冲场凝胶电泳(PFGE)检测产ESBLs菌株的质粒谱带。设计通用引物,用聚合酶链式反应(PCR)技术检测产酶株ESBLs相关编码基因bla,对扩增产物分别用限制性内切酶Pst I和Pvu II酶切,运用限制性片段长度多态性(RFLP)分析各菌株ESBLs的基因型别。 结果:本研究分离得到176株ExPEC,其中158株表现为多重耐药,占全部菌株数的89.77%。85株对第三代头孢类抗生素耐药,占全部菌株数的48.30%。这些菌株对喹诺酮类和氨基糖苷类的耐药率也分别达76%和35%以上。肠道外致病性大肠埃希菌对第三代头孢类抗生素和对氨基糖苷类及喹诺酮类抗菌药物的耐药存在一定的相关性。对ESBLs进行初筛,得到74株ESBLs可疑阳性菌,对其进行表型确证试验,可以确证得到59株产ESBLs菌,故本地ESBLs菌的检出率为33.52%。肉汤微量稀释法重复检测结果显示,大肠埃希菌ATCC 25922为非ESBLs菌的符合率为100%,肺炎克雷伯菌ATCC 700603为产ESBLs菌的符合率也为100%,可见该方法相当可靠;真实性检验结果显示,该方法的敏感度、特异度分别高达96.61%,100%,
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【学位授予单位】：福建医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2006
【分类号】：R378.2

【参考文献】

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本文编号：1350463