脱氧核酶阻断period1基因表达的体内外研究

发布时间：2017-12-29 19:17

  本文关键词：脱氧核酶阻断period1基因表达的体内外研究　出处：《四川大学》2005年博士论文　论文类型：学位论文

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【摘要】：药物成瘾是长期滥用药物造成的,已成为全球关心的医学和社会问题,对药物的精神依赖至今尚无理想的治疗方法,本研究立足于近日基因period1(per1)和药物成瘾的关系,采用脱氧核酶阻断per1基因的表达,深入探讨per1基因对药物成瘾影响作用,进而寻求解决药物成瘾的基因疗法。 针对period1(per1)RNA组分模板区设计合成10—23型脱氧核酶(deoxyribozyme)DRz164、DRz256,构建pcDNA3.1(+)-per1_(164:256)体外转录质粒,T7/SP6体外转录后,转录产物和DRz164或DRz256在一定的条件下行体外切割反应,用地高辛核酸检测试剂盒检测脱氧核酶对per1mRNA组分的体外切割效率。脂质体介导法,pcDNA3—per1和DRz分别导入NIH3T3细胞,逆转录聚合酶链反应和流式细胞术检测NIH3T3细胞per1表达。结果显示DRz164和DRz256可以特异性地切割per1mRNA组分,反应2h切割效率分别为63%和50.5%。pcDNA3—per1和DRz共转染NIH3T3后,per1基因表达下降,Per1蛋白生成减少。 预先小鼠脑室注射DRz164,建立吗啡成瘾(慢性依赖)动物模型,通过条件位置偏爱实验观察DRz164对吗啡奖赏效应的影响。最后一次吗啡(盐水)注射后每隔4h提取脑组织蛋白,western blot检测Per1蛋白变化,观察DRz164对Per1蛋白的影响。最后一次吗啡(盐水)注射后
[Abstract]:......
【学位授予单位】：四川大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2005
【分类号】：R346

【参考文献】

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本文编号：1351501