Sry核酸疫苗免疫方式初探

发布时间：2017-12-30 06:07

本文关键词：Sry核酸疫苗免疫方式初探　出处：《首都师范大学》2007年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】： SRY／Sry基因是公认的哺乳动物性别决定基因。研究表明，SPY／Sry基因正常存在，性腺就发育成雄性；相反，如果缺失或突变，性腺就发育成雌性。小鼠的性别决定发生在妊娠的10.5 d～12.5 d，Sry基因也仅在此时表达。本实验室已经通过肌肉注射Sry核酸疫苗的方法成功遏制了胚胎期Sry基因的作用途径，初步实现了胚胎雄性向雌性反转的性别控制，获得了XY雌性个体。下一步要研究的问题有很多，，比如优化此疫苗的免疫条件，研究其作用原理等。本实验主要针对Sry核酸疫苗的免疫方式进行了初步的探索，通过对不同免疫方式的免疫效率进行比较，分析此疫苗免疫方式与免疫效率的相关性，以便对此疫苗进行更深入的研究。实验过程中采用了基因枪注射与肌肉注射两种方法进行免疫，免疫剂量分别为2ug／只小鼠和100ug／只小鼠，每隔一周加强免疫一次，共免疫三次。与初次实验相比，本实验对疫苗的制备过程及免疫效率的检测过程做了较大改进，具体是疫苗制备过程中去除了疫苗本身所含的内毒素，仔鼠检测过程中采用巢式PCR及southern blotting技术对样品进行双重验证等。结果：1．肌肉注射组共检测了181只仔鼠，有2只发生了雄性向雌性的性别反转，反转效率约1.1％；基因枪注射组共检测240只仔鼠，有2只发生了性别反转，反转效率约0.8％。结论：这两种方法的免疫效率较低提示除了免疫方式以外还有更重要的因素影响此核酸疫苗的免疫效率；同时，性反转个体的再次获得又一次证明了此疫苗可有效阻断胚胎期的雄性发育通路，实现胚胎向雌性的性别反转。
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【学位授予单位】：首都师范大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2007
【分类号】：R392

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