小鼠载脂蛋白M基因的克隆及表达

发布时间：2017-12-30 12:19

  本文关键词：小鼠载脂蛋白M基因的克隆及表达　出处：《武汉大学》2005年硕士论文　论文类型：学位论文

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【摘要】：载脂蛋白M是新近发现的载脂蛋白。在各种脂蛋白的亚类中,载脂蛋白M主要存在于人血浆高密度脂蛋白中,但在富含甘油三脂的脂蛋白和低密度脂蛋白中也发现了载脂蛋白M。在所有的载脂蛋白中,与其他载脂蛋白相比,载脂蛋白M只占很少一部分。载脂蛋白M存在于所有的哺乳动物的基因组中,但它仅在肝脏和肾脏表达,在其他的组织和器官不表达。载脂蛋白M位于6号染色体主要组织相容性抗原复合体Ⅲ区。 载脂蛋白M的功能尚不清楚,除了与高密度脂蛋白的合成有关外,它可能在胆固醇的代谢和转运中起到特殊的作用。载脂蛋白M有膜蛋白的功能,它可能与脂蛋白颗粒和来自内质网膜的磷脂蛋白相结合,然后分泌到血浆中,并参与运输疏水性的小分子复合物。 本研究通过克隆并高效表达小鼠载脂蛋白M基因,以探讨其生物学功能。通过提取小鼠肝脏总RNA,采用RT-PCR技术,扩增正常成年小鼠肝细胞载脂蛋白M全长cDNA,并重组于原核表达载体pGEX-KG中,转化大肠杆菌BL21。经IPTG诱导后,收集菌体蛋白,进行SDS-PAGE鉴定;获得小鼠载脂蛋白M全长cDNA,测序结果与已发表的基因序列一致,重组蛋白以包涵体的形式进行表达,经SDS-PAGE分析,在相对分子量54kDa处有一特异性的蛋白条带。本研究成功克隆了正常成年小鼠的载脂蛋白M基因,并在大肠杆菌BL21中得到高效表达,为进一步制备载脂蛋白M抗体创造了有利条件。
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【学位授予单位】：武汉大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2005
【分类号】：R346

【共引文献】

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本文编号：1354909