戊型肝炎病毒ORF2编码蛋白抗原表位的特征与定位

发布时间：2018-01-08 23:15

  本文关键词：戊型肝炎病毒ORF2编码蛋白抗原表位的特征与定位　出处：《东南大学》2006年硕士论文　论文类型：学位论文

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【摘要】： 戊型肝炎病毒(Hepatitis E Virus,HEV)是戊型肝炎(Hepatitis E, HE)的病原体,无包膜,其基因组为单股正链RNA,含三个开放读码框(Open Reading Frame,ORF)ORF1、ORF2和ORF3。根据其全基因组序列分析,HEV可分为4个基因型:基因型Ⅰ,包括3个亚型,分别以HEV缅甸株(Ⅰa型)、巴基斯坦株(Ⅰb型)和摩洛哥株(Ⅰc型)为代表,以往以中国新疆株为代表的中国HEV与巴基斯坦株属同一亚型;基因型Ⅱ,以HEV墨西哥株为代表;基因型Ⅲ,由美国株及大多数猪HEV组成;基因型Ⅳ,包括新近发现的HEV中国株和台湾株。以往我国HE发病以Ⅰ型毒株为主要病原体,近期的研究报告显示Ⅳ型HEV是目前引起我国散发性HE的主要病毒株。与其它基因型不同的是,基因型Ⅳ的基因组中有一独特的单核苷酸插入,导致了ORF2和ORF3编码蛋白起始密码的移位,使得ORF2编码蛋白比其它基因型长12个氨基酸,OFF3编码蛋白比其它基因型短11个氨基酸。但为了便于与其它基因型毒株比较,在本研究中我们仍按照传统的HEV原型毒株缅甸株的序列进行氨基酸的定位。 有较多的研究报道HEV ORF2编码的衣壳蛋白含有多个抗原表位,特别是其富含疏水区的C端2/3部分存在多个能诱导免疫保护力的免疫优势B细胞抗原表位,因而ORF2编码蛋白成为目前HEV基因工程亚单位疫苗研究的热点。我们以往的研究发现,HEV ORF2基因编码的一段由452～617位氨基酸组成的重组蛋白(简称p166)含有HEV构型依赖性中和抗原表位,抗原性稳定,在I、II、III基因型毒株之间可诱发交叉中和反应。相关的灵长类动物攻击试验也证实HEV的Ⅰ、Ⅱ、III基因型之间可以发生交叉保护反应。但Meng等曾发现不同基因型HEV之间核苷酸序列的差异导致的氨基酸序列改变会影响HEV的抗原性,当以不同基因型和亚型的p166对HE病人和实验感染动物血清进行抗体ELISA滴定时,发现血清抗体滴度的高低与所用抗原的基因型有明显关系,提示不同基因型HEVORF2蛋白可能具有不同的抗原表位。我们曾通过制备单克隆抗体(McAbs)进行HEV抗原表位分析,发现HEV第I基因型重组蛋白(p166Bur)和第II基因型重组蛋白(p166Mex)既含有HEV共同的抗原表位,又含有基因型特异性的抗原表位,提示HEV第III、IV基因型的重组蛋白中也可能含有不同于第I、II基因型的抗原表位。继后我们又成功制备出第III基因型来源的抗-p166Us的三种不同类型McAbs,其中包括I、II、III、IV基因型共同的,III、IV基因型共有的和第III基因型特异的等,显示不同基因型和亚型HEV ORF2编码蛋白p166上确实存在多种类型抗原表位。 但是,对于近年在中国新发现的HEV第Ⅳ基因型毒株的抗原表位以及不同基因型毒株之间是否存在共同的中和抗原表位,至今尚无研究报道。因此,有必要对HEV第Ⅳ基因型毒株的抗原表位及其特点进行深入研究。为此,本研究采用代表HEV第IV基因型的中国株p166(p166Chn)为免疫原,制备抗-p166Chn的McAbs,进一步分析该基因型HEV
[Abstract]:Hepatitis E Virus ( HEV ) is a pathogen of hepatitis E ( HE ) and has no envelope . Its genome is single - strand positive strand RNA . It contains three subtypes : HEV , Myanmar ( type 鈪，

本文编号：1399063